Until now the results on profiling dopamine receptors in C. elegans have been incomplete and fragmentary. The aim of this study was to investigate the expression profile of dop-1 gene in C. elegans using 3 kb promoter with 3'-end locating before ATG of dop-1 gene. Methods. The strain of C. elegans with mutant unc-119 gene was used. To check a pattern of the dop-1 expression, the promoter of this gene was amplified using PCR. The animals were co-bombarded with plasmid pPD95.77 dop-1::GFP and reporter construct containing unc-119 gene. Results. Using GFP as a reporter protein, we built a whole picture of expression of dopamine receptor type 1 in C. elegans and found that this protein could be detected only in mechanosensory neurons such as PLM, PVQR, PVQL, ALNR, ALNL, DVAR, DVC.
Keywords: dopamine receptors, mechanosensory neurons, Caenorhabditis elegans, expression
Результати досліджень експресії дофамінових рецепторів в C. elegans наразі залишаються неповними і фрагментарними. Мета роботи полягала у вивченні профілю експресії дофамінового рецептора типу 1 (dop-1) в C. elegans з використанням промотору розміром 3 тис. п. н., 3'-кінцева послідовність якого розташована перед кодоном ATG гена dop-1. Методи. Культивування штаму C. elegans, мутантного за геном unc-119, з агаром NGM. Для перевірки паттерну експресії dop-1 ампліфіковано промотор гена методом ПЛР. Клітини тварин кобомбардували плазмідою pPD95.77dop-1::GFP та репортерною конструкцією з геном unc-119. Результати. Із застосуванням GFP як репортерного білка вдалося повністю охарактеризувати профіль експресії дофамінового рецептора першого типу в C. elegans. Висновки. Продемонстровано, що даний білок експресується в механосенсорних нейронах, таких як PLM, PVQR, PVQL, ALNR, ALNL, DVAR і DVC.
Ключові слова: дофамінові рецептори, механосенсорні нейрони, Caenorhabditis elegans, експресія
До настоящего времени результаты исследований экспрессии дофаминовых рецепторов в C. elegans остаются неполными и фрагментарными. Цель работы состояла в изучении профиля экспресии дофаминового рецептора первого типа (dop-1) в C. elegans с использованием промотора размером 3 тыс. п. н., 3'-концевая последовательность которого расположена перед кодоном ATG гена dop-1. Методи. Культивирование штамма C. elegans, мутантного по гену unc-119, с агаром NGM. Для проверки паттерна экспрессии dop-1 амплифицировали промотор гена методом ПЛР. Клетки животных кобомбардировали плазмидой pPD95.77dop-1::GFP и репортерной конструкцией с геном unc-119. Результаты. С использованием GFP в качесве репортерного белка удалось полностью охарактеризовать профиль экспрессии дофаминового рецептора первого типа в C. elegans. Выводы. Продемонстрировано, что данный белок детектируется в механосенсорных нейронах, таких как PLM, PVQR, PVQL, ALNR, ALNL, DVAR и DVC.
Ключевые слова: дофаминовые рецепторы, механосенсорные нейроны, Caenorhabditis elegans, экспрессия
