Мутаційний аналіз і бактеріальна експресія Dbl-гомологічного домену химерного онкобілка Вcr/Abl

Abstract

Знайдено відмінності в розподілі актинового скелета у кліт­инах здорових донорів (дифузне), хворих на гострий лімфобластний лейкоз, Ph'-позитивних клітинних культур та в більшості хворих на стадії властного кризу хронічного мієло­лейкозу (ХМЛ) (кортикальний розподіл), у той час як в одному випадку властного кризу ХМЛ спостерігалося утво­рення «dot-like» актинових структур, яке супроводжувалося мутаціями dbl-гомологічної області гена bcr/abl. Рекомбінантний Dbl домен Bcr/Abl було експресовано в рЕТ32 b експресійній системі і використано для отримання поліклональних антитіл. Отримані результати можуть сприяти розумінню природи властного кризу ХМЛ та розробці додат­кових методів діагностик

Обнаружены различия в распределении актинового скелета в клетках здоровых доноров (диффуз­ное), больных острым лимфобластным лейкозом, Ph'-позитивных клеточных культур и у большинства больных на стадии бластного криза хронического миелолейкоза (ХМЛ) (кортикаль­ное распределение), в то время как в одном случае бластного криза ХМЛ наблюдалось образование «dot-like» актиновых структур, сопровождающееся мутациями dbl гомологичной области гена bcr/abl Рекомбинантный Dbl домен Всг/Abl был экспрессирован в рЕТ32b экспресионной системе и использован для получения поликлональных антител. Полученные результаты могут способст­вовать пониманию природы бластнго криза ХМЛ и разработке дополнительных методов диагно­стики.

We obtained the differences of the acttn distribution in the cell from health donors (diffuse cytoplasmic distribution), patients with ALL, PhB-positive human cell line K362 and most cases CML blast crisis (cortical F-actin distribution) and in the one case of CML blast crisis a dot- like actin structures were observed. The revealing of dot-like actin distribution correlated with detection of mutations in dbl part of bcr/abl gene. Recombinant Dbl domain of Bcr/Abl was expressed in pET32b expression system and used for obtaining of the polyclonal antibody. Obtained data may cast light on the nature of CML blast crisis development and can be used for early detection of CML tumor progression.