Поляризація флюоресценції та в'язкість мікрооточення залишків триптофану еукаріотичної тирозил-тРНК синтетази

Abstract

Виміряно спектра поляризації власної флюоресценції тирозил-тРНК синтетази з печінки бика. Показано, що зменшення поляризації від 0,37 до 0,05 вздовж спектру флюоресценції у довгохвильовій області обумовлено зміною ефективності перенесення енергії між триптофановими залишками, які мають різні спектри флюоресиенції, а також релаксаційними процесами, що виникають у мікрооточенні залишків триптофану після фотозбудження. Визначено терміни життя флюоресценції синтетази при кімнатних температурах (τ=2 6–0 5 не, λem = 337 нм) в залежності від довжини хвилі випромінювання. Використовуючи рівняння Левшина – Перрена, розрахована в'язкість мікрооточення залишків триптофану за спектром випромінювання, котра зменшуються від 1,3 до 0,05 Па·с у довгохвильовій областіОцінено обертову рухомість залишків триптофану у молекулі синтетази за різних температур.

Измерены спектры поляризации собственной флюоресценции тирозил-тРНК синтетази из печени быка. Показано, что уменьшение 'величины поляризации от 0,37 до 0,05 вдоль спектра флюоресценции в длинноволновой области обусловлено изменением эффективности переноса энергий между триптофановыми остатками, обладающими различными спектрами флюоресценции, а также релаксационными процессами, возникающими в микроокружении остатков триптофана после фотовозбуждения. Определены времена жизни флюоресценции синтетазы при комнатных температурах (τ–2,6–0,5 не, λem–337 ни) в зависимости от длины волны излучения. Используя уравнение Левшина–Перрена, рассчитана вязкость микроокружения остатков триптофана по спектру излучения, которая уменьшается от 1,3 до 0,05 Па·с в длинноволновой области. Оценена вращательная подвижность остатков триптофана в молекуле синтетазы при разных темпер

Polarized spectra of intrinsic fluorescence of tyrosyl-tRNA synthetase from bovine liver have been studied. It is shown decreasing at polarization value from 0.37 to 0.05 along fluorescence spectrum in long wavelength field was caused both the change of energy transfer efficiency between tryptophanyl resudies, having different spectra of fluorescence, and relaxation process which appering in microenvironment of tryptophanyl resudies in enzyme after the photoexitation. The life time fluorescence of synthetase at room temperature has been determined in depending of emission wavelength (τ = 2.6 ± 0.5 ns, λem = 337 nm). The viscosity of microenvironment of tryptophanyl resudies along the emission spectrum, that decreasing from 1.3 to 0.05 Pa·s in long wavelength field has been calculated by Levshin-Perren equation. The torsional mobility of tryptophan resudies in enzyme molecule has been estimated at different temperatures.