ПЦР-амплификация, клонирование и секвенирование фрагмента кДНК, кодирующего нуклеотидсвязывающий домен тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих

Abstract

Проведены ПЦР-амплификация, клонирование и секвенирование кДНК-фрагмента, кодирующего N-концевой нуклеотидсвязывающий домен ( свертку Россмана) тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих. Впервые обнаружен уникальный вариант консервативного HIGH-подобного мотива, HVAY, в котором остаток глицина, считавшийся ранее абсолютно консервативным для всех аминоацил-тРНК синтетаз I структурного класса, заменен на остаток аланина.

Проведено ПЛР-ампліфікацію, клонування та секвенування кДНК-фрагмента, шо кодує N-кінцевий нуклеотидзв'язуючий домен (згортку Россмана) тирозил-тРНК синтетази ссавців. Вперше виявлено унікальний варіант консервативного HIGH-подібного мотиву, HVAY, у якому залишок гліцину, що раніше вважався абсолютно консервативним для всіх АРСаз І структурного класу, замінений на залишок аланіну.

cDNA fragment encoding the N-terminal nucleotide binding domain (Rossmann fold) of mammalian tyrosyl-tRNA synthetase has been PCR-amplified, cloned and sequenced. The unique variant of conservative HIGH-like motif, HVA Y, where glycine residue was substituted by alanine, has been observed for the first time.