Выделение индивидуальных белков из 50S субчастицы рибосом Thermus thermophilus. Кристаллизация белка TL7

Abstract

Для восьми белков 50S субчастиц рибосом из экстремального-термофильные бактерии Thermus thermophilus предложен селективный способ экстракции при 60 ° С в присутствии 0,5 М и 1 М NH4C1 и 50% этанола. В результате хроматографического разделения белков, на CM-сефарозой CL были получены пять отдельных белков (степень чистоты не менее 95%) . Один из них, TL7 (вероятно, аналог L6 белка в E.coli рибосомы), был закристаллизован методом «висящей» капли с сульфатом аммония в качестве осадителя.

Для восьми білків 50S субчастиц рибосом з екстремального-термофільні бактерії Thermus thermophilus запропонований селективний спосіб екстракції при 60 ° С у присутності 0,5 М і 1 М NH4C1 і 50% етанолу. В результаті хроматографічного розділення білків, на CM-сефарозой CL були отримані п'ять окремих білків (ступінь чистоти не менше 95%). Один з них, TL7 (ймовірно, аналог L6 білка в E.coli рибосоми), був закристалізований методом краплі що «висить» з сульфатом амонію як осаджувателя.

A method of selective extraction is suggested for eight proteins of 50S subparticles of ribosomes from extremal-thermophilic bacterium Thermus thermophilus at 60 °C in the presence of 0.5 M and 1 M NH4C1 and 50 % ethanol. As a result of chromatographic separation of extracted proteins on CM-sepharose CL five individual proteins (the purity is not less than 95 %) have been obtained. One of them, TL7 (probably, an analog of L6 protein from E. coli ribosomes), has been crystallized by the method of «hanging» drop with ammonium sulfate as a precipitant.