Разработанный ранее высокоэффективный метод криоконсервирования нормозооспермического эякулята был применен для единичных эпидидимальных спермиев с целью использования в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Клетки охлаждали в капиллярах с раствором 20% сахарозы и 15% глицерина от 22 до –35°С со скоростью 1 град/мин, от –35 до –70°С со скоростью 20 град/мин, а затем микрокапилляры погружали в жидкий азот. После отогрева выживаемость сперматозоидов составила 92%. Ооциты оплодотворяли микроинъекцией единичного спермия, после культивирования и оценки качества эмбрион переносили в полость матки. Частота наступления беременности после использования криоконсервированных спермиев была выше (53,1%), чем свежеаспирированных клеток (46,1%). Таким образом показана применимость использованного метода криоконсервирования в ВРТ для пациентов с азооспермией.
Розроблений раніше високоефективний метод кріоконсервування нормозооспермічного еякуляту було застосовано для поодиноких епідидімальних сперміїв з метою використання в програмах допоміжних репродуктивних технологій (ДРТ). Клітини охолоджували в капілярах з розчином 20% сахарози і 15% гліцерину від 22 до –35°С зі швидкістю 1 град/хв, від –35 до –70°С зі швидкістю 20 град/хв, а потім мікрокапіляри занурювали в рідкий азот. Після відігріву виживаність сперматозоїдів склала 92%. Ооцити запліднювали мікроін’єкцією поодинокого спермія, після культивування та оціювання якості ембріон переносили до порожнини матки. Частота настання вагітності після використання кріоконсервованих сперміїв була вищою (53,1%), ніж свіжоаспірованих клітин (46,1%). Таким чином, показано придатність застосованого методу кріоконсервування в ДРТ для пацієнтів з азооспермією.
Previously developed highly effective method for cryopreservation of normozoospermic ejaculate was applied for single epididymal spermatozoa for following using in assisted reproductive technologies (ART). The cells were cooled in microcapillaries with solution of 20% sucrose and 15% glycerol from 22 down to –35°C with rate of 1 deg/min, from –35 down to –70°C with rate of 20 deg/min and thereafter plunged into liquid nitrogen. Post-thaw survival of spermatozoa was 92%. Oocytes were fertilized by injection of single spermatozoa, the embryos were cultured, assessed for pronuclei peresence and transfered into uterus. Pregnancy rate after using cryopreserved cells was higher (53.1%) than after using fresh asperated cells (46.1%). Thus the utilized method of cryopreservation could be effectively used in ART for patients with azoospermy.
