Індукція апоптозу та некрозу лейкемічних клітин очищеними препаратами IgG сироватки крові мишей, яким тривалий час згодовували мозок великої рогатої худоби

Abstract

Досліджували властивості очищених препаратів IgG мишей. Встановлено, що усі препарати IgG мишей індукують загибель клітин лінії L1210 лейкемії миші. Найвищий рівень цитотоксичної активності виявлено за впливу IgG мишей, яким додатково до основного раціону згодовували мозок великої рогатої худоби. Загибель тест-клітин відбувалася як через апоптоз (характерні ознаки – руйнування ДНК, виявлене методом ДНК-комет, та конденсація і фрагментація хроматину, визначені флуоресцентною мікроскопією після фарбування клітин барвником Hoechst 33342), так і внаслідок некрозу. Останній оцінювали за рівнем активності лактатдегідрогенази, яка вивільнялася із зруйнованих клітин лінії L1210 у культуральне середовище, та світловою мікроскопією після забарвлення клітин за Романовським-Гімза.

IgG preparations of mice under study were tested for their ability to induce death of cells of L1210 line of murine leukemia. The highest level of cytotoxic activity was found at affecting cells with IgG of mice that were additionally fed with cattle brain. It was shown that the test cells were dying by both apoptosis (typical signs are destruction of DNA, revealed by the method of DNA-comets, condensation and fragmentation of chromatin, discovered by fluorescent microscopy of cells, stained with Hoechst 33342) and necrosis. The latter was estimated taking into account the level of lactate dehydrogenase activity, which appeared in cultural medium of L1210 cells, and by light microscopy after cell staining according to Romanovsky-Gimza.

Исследовали свойства очищенных препаратов IgG мышей. Установлено, что все препараты IgG мышей индуцируют гибель клеток линии L1210 лейкемии мыши. Наивысший уровень цитотоксической активности обнаружен при влиянии IgG мышей, которым дополнительно к основному рациону скармливали мозг крупного рогатого скота. Гибель тест-клеток происходила как вследствие апоптоза (характерные признаки – разрушение ДНК, обнаруженное методом комет ДНК, конденсация и фрагментация хроматина, выявленные флуоресцентной микроскопией после окрашивания клеток красителем Hoechst 33342), так и из-за некроза. Последний оценивали по уровню активности лактатдегидрогеназы, высвобождаемой из разрушенных клеток линии L1210 в культуральною среду, и световой микроскопией после окрашивания клеток по Романовскому-Гимза.