Функціональні та регуляторні особливості кінази рибосомного білка S6 типу β

Abstract

Нещодавно клоновано нову форму кінази рибосомного білка S6, названу p70Sb кіназа β, амі­нокислотна послідовність якої має високий ступінь гомології з відомою p70S6 кіназою α. В роботі представлено результати порівняльного аналізу кінетики активації сироваткою α2- і β2-форм S6 кінази, експресованих у клітинах НЕК293. Виявлені відмінності вказують на різний в часовому відношенні прояв їхньої функціональної активності in vivo. Інкубація трансфікованих клітин з імуносупресором рапаміцшюм пригнічує індуковану сироваткою активацію як р70α2, так і p70β2 кіназ. Пригнічення р70β2 відбувається за низьких концентрацій рапаміцину. Одночасно β2-форма кінази є менш чутливою до високих концентрацій інгібітора у порівнянні з р70α2. Отримані дані дозволяють припустити існування диференційних механізмів модуляції сигнальних шляхів, що опосередковують активацію α- і β-форм S6 кінази.

Недавно клонирована новая форма киназы рибосомного белка S6, названная p70S6 киназа β, аминокислотная последова­тельность которой имеет высокую степень гомологии с известной p70S6 киназой а. В работе представлены результа­ты сравнительного анализа кинетики активации сывороткой α2- и β2-форм S6 киназы, экспрессированных в клетках НЕК293. Установленные отличия указывают на разное в часовом отношении проявление их функциональной активно­сти in vivo. Инкубация трансфицированных клеток с иммуносупрессором рапамицином угнетает индуцированную сыворот­кой активацию как р70α2, так и р70β2 киназ. Угнетение p70β2 происходит при низких концентрациях рапамицина. Одновре­менно β2-форма киназы менее чувствительна к высоким концентрациям ингибитора по сравнению с р70α2. Полученные данные дают основание предположить существование диффе­ренциальных механизмов модуляции сигнальных путей, кото­рые опосредуют активацию α- и β-форм S6 киназы.

A novel ribosomal S6 kinase, termed p70S6 kinase β, has been recently identified. It is highly homologous to known p70/p85 S6 kinase (p70S6 kinase α) in catalytic, kinase extension and auto-inhibitory domains, but differs significantly in the regulatory N- and C-terminal regions. Here we report the kinetics of serum-induced activation of cytoplasmic isoforms of p70S6 kinase α and β (p70α2 and p70β2) in transiently transfected HEK293. Both kinases exhibit biphasic activation upon serum stimulation, but differ in the appearance of peaks of their S6 specific activity. We also found that p70α2 and p70β2, when overexpressed in HEK293 cells, are sensitive to the immunosuppressant rapamycin. However, p70β2 kinase is more sensitive to low concentrations of rapamycin, when compared with p70α2. At the same time, high concentrations of rapamycin are inhibitory to a higher extent towards p70α2, than p70β2 kinase. Taken together, our results indicate that p70α2 kinase is activated earlier in response to serum and is less sensitive to high concentration of rapamycin, in comparison to p70α2. These differences indicate the existence of alternative signalling mechanisms, involved in the regulation of p70β2 kinase.