Комплекс α₂- макрогло булин–трипсин как чувствительный элемент потенциометрического биосенсора для опосредованного количественного определения протеиназ

Abstract

Изучена возможность использования комплекса α₂-макроглобулин (α₂М)–трипсин в качестве чувствительного элемента потенциометрического биосенсора для опосредованного количествен­ного определения протеиназ по их эстеразной активности при гидролизе Na-бензоил-L-аргинин этилового эфира (ВАЕЕ). Оптимизированы условия иммобилизации комплекса α₂М–трипсин на поверхность рН-чувствительного полевого транзистора в насыщенных парах глушарового альдегида. Изучены свойства разработанной мембраны. Определены оптимальные условия для измере­ния гидролиза ВАЕЕ с помощью полученного на ее основе датчика. Показана принципиальная возможность определения концентрации ВАЕЕ в области 0,1–1,0 мМ и трипсина в области 0,1–30 ед. акт/мл. Сделан вывод о перспективности использования разработанной мембраны в качестве чувствительного элемента потенциометрического биосенсора.

Вивчено можливість використання комплексу α₂-макроглобулін (α₂М)–трипсин як чутливого елемента потенціометричного біосенсора для опосередкованого кількісного визначення протеїназ за їхньою естеразною активністю при гідролізі Na-бензоїл-Д-аргінін етилового ефіру (ВАЕЕ). Оптимізовано умови іммобілізації комплексу α₂М–трипсин на поверхню рН-чутливого польового транзистора в насичених парах глутарового альдегіду. Вивчено властивості розробленої мембрани. Знайдено оптимальні умови вимірювання гідролизу ВАЕЕ за допомогою одержаного на її основі датчика. Показано принципову можливість визначенння концентрації ВАЕЕ в межах 0,1–1,0 мМ і трипсину –0,1–30 ед. акт/мл. Зробле­но висновок щодо перспективності використання розробленої мембрани як чутливого елемента потенціометричного біосенсора.

A possibility of application of the α₂-macroglobulin (α₂M)–trypsin complex as a sensitive element of a potentiometric biosensor for mediated Quantitative determination of proteinases through their esterase activity at the hydrolysis of Na-benzoyl-L-arginin-ethyl ester (BAEE) has been studied. The α₂M–trypsin complex immobilization at pH-FET surface in saturated glutaraldehyde (GA) vapours has been optimized. The selective membrane characteristics have been studied. The optimal conditions of measuring BAEE hydrolysis by the biosensor obtained have been determined. A possibility to detect 0.1–1.0 mM BAEE and trypsin activity within the range of 0.1–30 ill ml has been shown.'A conclusion has been made that the membrane developed is promising as a sensitive element of the potentiometric biosensors.