Изучение ДНК штаммов малярийных паразитов, чувствительного и устойчивых к хлорохину, методом эндонуклеазного рестрикционного анализа

Abstract

Проведен сравнительный рестрикционный анализ ДНК малярийных паразитов чув­ствительного штамма Н, штамма LNK-&5 со спонтанно возникшей невысокой устой­чивостью к хлорохину и селекционированной линии LNK-65 ХлР, высокоустойчивой к хлорохину. При гидролизе ДНК эндонуклеазами рестрикции EcoRI, Hindlll и BamHl и последующем разделении продуктов гидролиза в 0,8 %-м агарозном геле при окраске бромистым этидием обнаружены стабильные отличия в картинах рест­рикции ДНК малярийных паразитов. В составе рестриктов ДНК линии LNK-65 ХлР, селекционированной из штамма LNK-65 ш высокую устойчивость к хлорохину, имеются добавочные рестрищионные полосы при гидролизе EcoRI, Hindlll, BamHI, отсутствующие у родительского штамма. Значительные отличия в картинах рестрикции ДНК штаммов Н и LNK-65, очевидно, вызваны принадлежностью их к различным видам P. berghei и Р. уоеШ соответственн.

За допомогою метода рестрикційного аналізу порівняно ДНК малярійних паразитів гризунів Plasmodium berghei чутливого штама Н, штама LNK-65 з невисокою стій­ кістю до хлорохіну, яка виникла спонтанно, та селекційованого штама LNK-65 ХлР з високою стійкістю до хлорохіну. У складі рестриктів ДНК штама LNK-65 ХлР спостерігаються додаткові рестрикційні смуги при EcoRI-, Hindlll- і ВаmH1-гідролізі Значні розбіжності у картині рестрикції ДНК штамів Н і LNK-65, скоріш за все, викликані приналежністю їх до різних видів малярійного паразита гризунів.

DNAs from various Plasmodium berghei strains with different chloroquine (Chi) sensi­tivities were analysed by agarose gel electrophoresis following digestion with restriction endonucleases EcoRI, Hindlll and BamHI. The DNA patterns for the two Chl-resistant strains – LNK-65 strain with 2–3 fold increased Chl-resistance and LNK ChlR line with 7–10 fold increased, Chl-resistance (derived from the parent LNK-65 strain by stepwise selection in Chi) show similarity, but some additional bands of DNA digests are observed for LNK ChlR strain compared to the parent LNK strain. DNAs of ma­larial parasites from the sensitive N strain and from the Chl-resistant strains (LNK-65 and LNK ChlR) yield recognizably distinct patterns, so the resistant strains are sugges­ted to belong to another Plasmodium species.