Влияние ионизирующего излучения на структурную организацию хроматина печени крыс разного возраста

Abstract

Белых крыс линии Вистар двух возрастных групп ( 6–8 месяцев, взрослые и 26–28 месяцев, старые) подвергали рентгеновскому облучению в дозе 2 Гр и брали в опыт через 1ч и 4 сут после облучения. Была исследована динамика выхода экстрагируемых низкосолевым буфером фрагментов хроматина (ПДН) из ядер печени в условиях активации Са²⁺, Mg²⁺-эндонуклеазы, а также характеристики фракций репрессированного (РХ), транскрипционноактивного (АХ) и прочно связанного с матриксом (MX) хроматина. Показано, что при старении в ядрах печени крыс увеличивается содержание ПДН, экстрагируемых низкосолевым буфером в «нулевое время». Вследствие облучения этот показатель также увеличивается в ядрах печени взрослых крыс через 4 сут, старых–уже через 1 ч. Скорость выхода ПДН, расщепляемых эндонуклеазой, увеличена у старых интактных животных по сравнению со взрослыми и изменяется после облучения только в этой возрастной группе. Относительное количество РХ увеличено в ядрах старых интактных животных по сравнению со врослыми и в ядрах облученных животных по сравнению с интактными. Полученные результаты указывают на определенное сходство возрастных и радиоиндуцированных преобразований хроматина печени, а также на большую чувствительность хроматина печени старых животных к действию ионизирующей радиации.

Білих щурів лінії Вістар двох вікових груп (6–8 міс., дорослі та 26–28 міс., старі) піддавали рентгенівському опроміненню у дозі 2 Гр і брали в дослід через 1 год і 4 доби після опромінення. Було досліджено динаміку виходу екстрагованих низько сольовим буфером фрагментів хроматину (ПДН) із ядер печінки за умови активації Са²⁺, Mg²⁺-ендонуклеази, а також характеристики фракцій репресованого (РХ), транскрипційно активного (АХ) та міцно зв'язаного з матриксом (MX) хроматину. Показано, що за старіння у ядрах печінки щурів зростає вміст ПДН, які екстрагуються низькосольовим буфером у «нульовий час». Внаслідок опромінення цей показник також збільшується у ядрах печінки дорослих щурів через 4 доби, старих–уже черех 1 год. Швидкість виходу ПДН, які розщеплюються ендонуклеазою, збільшена у старих інтактних тварин порівняно з дорослими і змінюється після опромінення лише у цій віковій групі. Відносна кількість РХ збільшена у ядрах старих інтактних тварин у порівнянні з дорослими і в ядрах опромінених тварин у порівнянні з інтактними. Отримані результати вказують на схожість вікових та радіоіндукованих перетворень хроматину печінки, а також на більшу чутливість хроматину печінки старих тварин до дії іонізуючої радіації.

Wistar adult (6–8mo) and old (26–28mo) rats were irradiated withX-rays at a dose of 2Gy. The kinetics of release of chromatin fragments (CF) extracted by low-salt buffer from liver nuclei at Ca²⁺, Mg²⁺-endonuclease activation, and the features of repressed (RC), transcriptionally active (AC) and matrix-bound (MC) chromatin fractions were evaluated in 1 h and 4 days after irradiation. At «zero time» of endonuclease activation, the content of extracted CF increased in nuclei of intact old rats as compared with adult ones. There was an increase of this parameter in the liver nuclei of adult and old rats in 4 days and 1 h after irradiation accordingly. The release rate of CF cleavaged by activated endonuclease increased in the nuclei of old intact rats in comparison with adult animals, and changes of this rate were observed after the irradiation only in old rat nuclei. The relative amount of RC was greater both in nuclei of intact old animals and in nuclei of irradiated rats. These data testify to the resemblance of age-associated and X-ray-induced reorganization ofchromatin structure and indicate the increased susceptibility of liver chromatin of old rats to ionizing irradiation.