Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика

Abstract

Проведен ограниченный протеолиз лейцил-тРНК-синтетазы (ЛРС) в присутствии различных конформеров тРНК. Активные конформеры тРНКa способны защищать ЛРС от действия трипсина, в то время как в присутствии неактивных конформеров тРНКi и защитного эффекта не наблюдается. В результате ингибиторного анализа установлено, что неактивные конформеры способны ингибировать реакцию аминоацилирования тРНКa+i. Ренатурация тРНКa+i приводит к исчезновению эффекта. Настоящие результаты, как и полученные ранее данные по термоинактивации ЛРС в присутствии тРНКа и тРНКa+1, свидетельствуют о различиях в свойствах их комплексов с ЛРС.

Проведено обмежений протеоліз лейцил-тРНК-синтетази (АРС) за присутності різних конформерів тРНК. Активні конформери тРНКа здатні захищати ЛРС від дії трипсину, тоді як за присутності неактивних конформеров тРНКi ᶦ захисного ефекту не спостерігається. В результаті інгібіторного аналізу встановлено, що неактивні конформери здатні пригнічувати реакцію аміноацилювання тРНКa+i Ренатурація тРНКa+i призводить до зникнення ефекту. Справжні результати, як і отримані раніше дані по термоінактивації ЛРС за присутності тРНКа і тРНКa+1, свідчать про відмінності у властивостях їхніх комплексів з ЛРС.

The partial proteolysis of leucyl-tRNA synthetase (LRS) was carried out in the presence of different tRNA conformers. Active tRNA conformers (tRNAa) were found to protect the LRS against proteolysis, while inactive conformers (tRNAi) did not show the protecting effect. tRNAa+i inhibited the rate of aminoacylation as evidenced by the inhibitory analysis, but tRNAa+i renaturation eliminated this effect. These results as well as recent data on LRS thermoinactivation demonstrate the difference between tRNAa-LRS and tRNAтРНКa+i·LRS complexes