Результати дослідження персистенції прихованої хромосомної нестабільності в лімфоцитах периферичної крові практично здорових волонтерів

Abstract

Для вивчення персистенцiї прихованої хромосомної нестабiльностi (ПХН) в соматичних клiтинах людини проведено добровiльне цитогенетичне обстеження 15 практично здорових чоловiкiв, якi заперечували свiдомий контакт з мутагенними чинниками, з використанням тесту “G₂-bleomycin sensitivity assay” при короткотривалому (48 год) та довгостроковому (100 год) культивуваннi лiмфоцитiв периферичної кровi. Встановлено, що фонова частота аберацiй хромосом в лiмфоцитах обстежених осiб вiдповiдала рiвню спонтанного соматичного хромосомного мутагенезу та достовiрно не вiдрiзнялася при обох строках культивування клiтин. При короткотривалiй iнкубацiї лiмфоцитiв з блеомiцином пiдвищилася середньогрупова частота хромосомних аберацiй зi значними мiжiндивiдуальними коливаннями, якi не залежали вiд фонових цитогенетичних показникiв. У довгострокових культурах у всiх обстежених осiб вiрогiдно зменшилася частота хромосомних аберацiй вiдносно показникiв першого мiтозу, завдяки чому знизився не тiльки цитогенетичний ефект по групi в середньому, але й середньогруповий додаток до фонового рiвня аберацiй хромосом, що свiдчить про поступову елiмiнацiю аберантних клiтин у послiдовних мiтозах. Iнтенсивнiсть елiмiнацiї хромосомних порушень iстотно варiювала у рiзних осiб i не залежала як вiд величин фонового цитогенетичного ефекту в iнтактних культурах, так i вiд iндивiдуальних рiвнiв хромосомних аберацiй, iндукованих блеомiцином при короткотривалому культивуваннi. Одержанi результати пiдтвердили значення генетично зумовлених мiжiндивiдуальних особливостей щодо iндукцiї та персистенцiї ПХН в соматичних клiтинах людини.

Для изучения персистенции скрытой хромосомной нестабильности (СХН) в соматических клетках человека проведено добровольное цитогенетическое обследование 15 практически здоровых мужчин, отрицающих сознательный контакт с мутагенными факторами, с использованием теста “G₂-bleomycin sensitivity assay” при кратковременном (48 час) и долгосрочном (100 час) культивировании лимфоцитов периферической крови. Установлено, что фоновая частота аберраций хромосом в лимфоцитах обследованных лиц соответствовала уровню спонтанного соматического хромосомного мутагенеза и достоверно не отличалась при обоих сроках культивирования клеток. При кратковременной инкубации лимфоцитов с блеомицином повысилась среднегрупповая частота хромосомных аберраций со значительными межиндивидуальными колебаниями, которые не зависели от фоновых цитогенетических показателей. В долгосрочных культурах у всех обследованных лиц достоверно снизились частоты хромосомных аберраций относительно показателей первого митоза, благодаря чему по группе в среднем уменьшился надфоновый уровень аберраций хромосом, что свидетельствует о постепенной элиминации аберрантных клеток в последовательных митозах. Интенсивность элиминации хромосомных нарушений существенно варьировала у разных лиц и не зависела как от величин фонового цитогенетического эффекта в интактных культурах, так и от индивидуальных уровней хромосомных аберраций, индуцированных блеомицином при кратковременном культивировании. Полученные данные подтвердили значение генетически детерминированных межиндивидуальных особенностей для индукции и персистенции СХН в соматических клетках человека.

The hidden chromosome instability (HCI) persistence in somatic human cells, the voluntary cytogenetic examination of 15 healthy males, who denied contact with mutagenic factors, in short- and long-term cultures of peripheral blood lymphocytes (during 48 and 100 hours, respectively) using “G₂-bleomycin sensitivity assay” has been conducted. The background frequency of chromosome aberrations under the both terms of cultivation corresponded to the level of spontaneous somatic chromosome mutagenesis and did not differ significantly in terms of both cell cultures. Under the short-term incubation of lymphocytes with bleomycin, the mean-group frequency of chromosome aberrations essentially increased with considerable interindividual fluctuations that are independent of the background cytogenetic parameters. In all long-term exposed cultures, the frequency of chromosome aberrations decreased significantly in comparison with the first mitosis data, whereby not only the mean-group cytogenetic effect decreased, but the above spontaneous cytogenetic effect as well, indicating the gradual elimination of aberrant cells in successive mitosis. The intensity of the elimination of chromosome abnormalities varied considerably in different individuals and did not depend on the values of the background cytogenetic effect in intact cultures and on the individual levels of chromosome aberrations induced by bleomycin in short-term exposed cultures. The data confirmed the importance of genetically determined interindividual peculiarities for the induction and the persistence of HCI in somatic human cells.