Стабильная экспрессия беспромоторного гена bar в трансформированных растениях

Abstract

Фосфотрицинустойчивые растения двух промышленных яровых сортов рапса (Brassica napus L. var. oleifera DC.) получены путем Agrobacterium tumefaciens – опосредованной трансформации листовых дисков. Векторные конструкции содержали беспромоторную кодирующую последовательность гена фосфинотрицин ацетилтрансферазы (bar), которая была размещена между двумя инвертированными lox-сайтами (элементы системы Cre/lox рекомбинации фага Р1), и селективный ген неомицинфосфотрансферазу II (nptII). Наличие введенных генов в геноме полученных растений подтверждено с помощью ПЦР. Показано их стабильное и сцепленное наследование в поколениях Т1 и Т2.

Рослини двох промислових сортів ріпака (Brassica napus L. var. oleifera DC.), які є стійкими до фосфінотрицину, отримано шляхом Agrobacterium tumefaciens-опосередкованої трансформації листових дисків. Векторні конструкції несли безпромоторну кодуючу послідовність гена фосфінотрицинацетилтрансферази (bar), яка була розташована між двома інвертованими lox сайтами (елементи системи Cre/lox рекомбінації фага Р1), і селективний ген неоміцинфосфотрансферази II (nptII). Наявність в геномі отриманих рослин введених генів підтверджено за допомогою ПЛР. Показано їх стабільне та зчеплене успадкування у поколіннях Т1 і Т2.

Phosphinothricin resistant plants of two rapeseed (Brassica napus L. var. oleifera DC.) spring industrial cultivars were obtained by Agrobacterium tumefaciens leaf disk transformation. Vector constructions contained the promoterless coding sequence of phosphinothricin acetyltransferase (bar) gene located between two inverted lox sites (elements of Cre/lox recombination system of P1 phage) and selective neomycinphosphotransferase II gene (nptII). Integration of the alien genes was confirmed by the PCR analyses. Stable and linked inheritance of foreign genes in Т1 and Т2 progeny was shown.