Поликлональные антитела против поверхностного клеточного маркера CD34 человека

Abstract

Разработан высокоэффективный и недорогой лабораторный способ получения и очистки поликлональных антител против поверхностного клеточного маркера CD34 человека. Показано, что клонированный в клетки E. coli негликозилированный рекомбинантный белок, содержащий внеклеточный фрагмент антигена CD34 человека, при выделении из бактерий сохраняет необходимые антигенные детерминанты и при иммунизации индуцирует продукцию специфических поликлональных антител, способных распознавать нативный антиген на поверхности клеток. Полученные антитела могут быть использованы для фенотипирования CD34+ клеток методами иммуноцитохимии и проточной цитометрии.

Розроблено високоефективний та недорогий лабораторний спосіб одержання та очищення поліклональних антитіл проти поверхневого клітинного маркера CD34 людини. Показано, що клонований в клітини E. coli неглікозильований рекомбінантний білок, що містить зовнішньоклітинний фрагмент антигена CD34 людини, при виділенні з бактерій зберігає необхідні антигенні детермінанти та при імунізації індукує продукування специфічних поліклональних антитіл, що здатні розпізнавати нативний антиген на поверхні клітин. Одержані антитіла можуть бути використані для фенотипування CD34+ клітин методами імуноцитохімії та проточної цитометрії.

An efficient and inexpensive laboratory approach for the generation and the purification of polyclonal antibodies to human antigen CD34 was developed. It was shown that cloned refolded and purified from Escherichia coli recombinant extracellular fragment of CD34 antigen retained immunogenic determinants of cell-surface expressed CD34. Immunization of mice with unglycosylated truncated recombinant protein elicit polyclonal antibodies specific for the native human antigen CD34. The antibodies generated are applicable for phenotyping of CD34+ cells using immunocytochemistry and flow cytometry assays.