Використання міжродової кон’югації Escherichia coli – streptomyces для перенесення рекомбінантних ДНК в штам S. nogalater IMET43360

Abstract

Успішне перенесення досліджувальних плазмід в клітини S. nogalater IMET43360 за допомогою міжродової кон’югації в системі E. coli – Streptomyces робить цей метод зручним інструментом для конструювання даного штаму. За допомогою ДНК–ДНК гібридизації визначено характер інтеграції плазмід pVWB і pRT801 та досліджено їхній вплив на біосинтез ногаламіцину. Результати наших досліджень дають змогу більш детально вивчати функціонування генів біосинтезу ногаламіцину у S. nogalater IMET43360. Використовування кон’югації для заміщення, руйнування генів та гетерологічної експресії дозволить отримувати нові «гібридні» антибіотики, що зможуть продукуватися цим штамом.

Успешное перенесение исследуемых плазмид в клетки S. nogalater IMET43360 с помощью межродовой конъюгации в системе E. coli – Streptomyces делает этот метод удобным инструментом для конструирования указанного штамма. Использование ДНК– ДНК гибридизации позволило определить характер интеграции плазмид pVWB и pRT801, а также исследовать их влияние на биосинтез ногаламицина. Результаты наших исследований позволяют более детально изучать функционирование генов биосинтеза ногаламицина у S. nogalater IMET43360, а использование конъюгации для замещения, разрушения генов и гетерологичной экспрессии позволит получить новые «гибридные» антибиотики, которые могут продуцироваться этим штаммом.

Successful transfer of the studied plasmids into S. nogalater IMET43360 cells using bacterial conjugation in the system E. coli – Streptomyces is an appropriate method for constructing this strain. Using DNA–DNA hybridization the character of integration of pVWB and pRT801 plasmids has been studied. The influence of these plasmids on nogalamycin biosynthesis has been investigated as well. The obtained results enable detailed study of nogalamycin gene functioning in S. nogalater IMET43360. The use of conjugation for substitution, destruction of genes, and heterological expression allows to get new «hybrid» antibiotics produced by this strain.