Влияние осмотического воздействия на детергентный лизис эритроцитов человека

Abstract

Исследован гемолиз эритроцитов человека в средах, содержащих NaCl и сахарозу разной молярности, под воздействием неионных (Твин-20 – полиоксиэтиленсорбитан монолаурат; Тритон Х-100 – октилфенол полиэтиленгликоль) и ионных (ЦТАБ – цетилтриметиламмонийбромид; ДСН – додецил-сульфат натрия) детергентов различной концентрации. Изучено действие данных детергентов на лизис клеток в присутствии модификатора агрегатного состояния белка полосы 3 – ДИДС (4,4- диизотиоцианостильбен 2,2-дисульфонат динатриевая соль). Процент гемолиза эритроцитов увеличивается при повышении концентрации детергентов в растворе. В исследуемых растворах характер развития гемолиза одинаков в присутствии всех детергентов. В растворе с 0,15М NaCl; 0,5М сахарозы; 20мМ Трис (рН 7,4) установлена наибольшая сохранность клеток в присутствии всех указанных детергентов. Модификатор ДИДС в среде усиливает гемолиз в клетках, хотя не изменяет тенденцию его развития в средах, содержащих NaCl и сахарозу, в присутствии неионных и ионных детергентов. Установлено, что среда, содержащая 0,15 М NaCl и 0,5М сахарозы, обеспечивает устойчивость эритроцитов к детергентам. Интенсивность такого защитного действия и усиливающего гемолиз действия ДИДС зависит от вида детергента.

Досліджено гемоліз еритроцитів людини в розчинах , які містять NaCl та сахарозу (різної молярності), під впливом неіонних (Твін-20 – поліоксиетиленсорбітан монолаурат; Тритон Х-100 – октилфенол поліетиленгліколь) та іонних (ЦТАБ – цетилтриметиламонійбромід; ДСН – додецил-сульфат натрію) детергентів з різною концентрацією. Вивчена дія цих детергентів на лізис клітин у присутності модифікатора агрегатного стану білка смуги 3 – ДІДС (4,4-діїзотіоціаностилбен 2,2-дисульфонат динатрієва сіль). Відсоток гемолізу еритроцитів збільшується при підвищенні концентрації детергентів у розчині. В досліджених розчинах характер розвитку гемолізу всіх детергентів однаковий. У розчині 0,15M NaCl; 0,5M сахарози; 20 мМ Трис (рН 7,4) виявлена найбільша збереженість клітин у присутності вказаних детергентів. Модифікатор ДІДС у середовищі підсилює гемоліз у клітинах, хоча не змінює тенденцію його розвитку в середовищах, що містять NaCl та сахарозу, в присутності неіонних та іонних детергентів. Встановлено, що розчин, який містить 0,15 М NaCl і 0,5М сахарози, забезпечує стійкість еритроцитів до детергентів. Інтенсивність захисної дії та підсилюючої гемоліз дії ДІДС залежить від виду детергенту.

There was studied the human erythrocyte hemolysis in the media, containing NaCl and sucrose of different molarity under the effect of non-ionic detergents (Tween 20: polyoxyethylene sorbitan monolaurate; Triton X-100: octylphenol polyethylene glycol) and ionic ones (CTAB: cetyl trimethyl ammonium bromide; SDS: sodium dodecyl sulphate) of various concentrations. Their effect on cell lysis in the presence of aggregate state modifier of band 3 protein: DIDS (4,4-diisothiocyanostilbene-2,2-disulfonic acid) was studied. The percentage of erythrocyte hemolysis increases when augmenting detergent concentration in solution. In the solution with 0.15 M NaCl; 0.5 M sucrose; 20 mM Tris (pH 7.4) we fixed the highest cell integrity in the presence of all mentioned detergents. DIDS modifier in the medium strengthens hemolysis in cells, although does not change the tendency of its development in NaCl and sucrosecontaining media in the presence of ionic and non-ionic detergents. The medium, containing 0.15 M NaCl and 0.5 M sucrose was established to provide the erythrocyte resistance to detergents. The intensity of such a protective effect and hemolysis strengthening DIDS effect depends on a detergent type.