Фізико-хімічні властивості поліедрину вірусу ядерного поліедрозу лунчастого шовкопряду, Selenephera lunigera

Abstract

Поліедрин отримано розчиненням поліедрів «лужним» (рН 10,5) та «оцтовокислим» (67 % CH3COOH) способами. За допомогою електрофорезу в поліакриламідному гелі показано, що «оцтовокислий» поліедрин являє собою один компонент, а «лужний» складаться з вихідного компонента та його фрагментів. При ультрацентрифугуванні «оцтовокислого» поліедрину в 67 %- CH3COOH виявляється один компонент з коефіцієнтом седиментації 1,9 S, а при ультрацентрифугуванні «лужного» поліедрину в розчинах з рН 10,5 виявляються три олігомерних компоненти з коефіцієнтами седиментації 13S (70 %), 19S (20 %) та 23 S (10 %). Дансил-методом виявлено, иір препарат «лужного» білка містить шість N-кінцевих залишків амінокислот – Met, Val, Ile, Leu, Thr, Lys. «Оцтовокислий» білок не містить вільної N-кінцевої аміногрупи. Карбоксипептидаза А +В відщеплює від «оцтовокислого» білка лише один залишок – тирозин. Побудовано пептидну карту «лужного» поліедрину і визначено амінокислотний склад «оцтовокислого».

Полиэдрин получен растворением полиэдров «щелочным» (рН 10,5) и «уксуснокислым» (67 %-я СН3СООН) методами. С помощью электрофореза в полиакриламидном геле установлено, что «уксуснокислый» полиэдрин содержит один компонент, а «щелочной» – исходный компонент и его фрагменты Ультрацентрифугированием показано, что «уксуснокислый» полиэдрин в 67 %-й СН3СООН образует один компонент с коэффициентом седиментации 1,9 S, а «щелочной» полиэдрин в растворах при рН 10,5 образует три олигомерных компонента с коэффициентами седиментации 13S (70 %), 19S (20 %) и 23S (10 %). Дансил-методом выявлено, что препарат «щелочного» белка содержит шесть N-концевых остатков аминокислот, а «уксуснокислый белок» не содержит свободной N-концевой аминогруппы. Построена пептидная карта «щелочного» полиэдрина и определен аминокислотный состав «уксуснокислого».

The polyhedrin was obtained by polyhedra dissolution according to the alkaline (pH 10.5) and acetic acid (67 % CH^COOH) methods. It was shown by polyacrilamid gel electrophoresis that acetic polyhedrin contained one component of molecular weight (m. w.) 25000 while alkaline polyhedrin contained 28500-component and its fragments of m. w. 8000, 10000, 14000, 19000, 25000. It was shown by ultracentrifugation that acetic acid polyhedrin revealed in 67 % CH3COOH one monomer component with sedimentation coefficient of 1,9S and alkaline polyhedrin revealed in pHW.5 solution three oligomeric components with sedimentation coefficients of 13S (70 %), 19S (20 %) and 23S (JO %). It was shown by the Dansyl method that alkaline protein contained six N-terminal amino acid residues: Met, Val, Leu, Thr, Lys while Acetic acid polyhedrin had no N-terminal NH2-group. The peptide map of alkaline polyhedrin was prepared, and amino acid composition of acetic acid polyhedrin was determined.