Отримання міжтрибних соматичних гібридів дигеномного (Orychophragmus violaceus + Arabidopsis thaliana) і тетрагеномного (O. violaceus + Brassica juncea + A. thaliana) походження та їхнє використання для вивчення поведінки гетерологічної системи транспозонів Spml/dSpm

Abstract

У результаті соматичної гібридизації отримано міжтрибні гібриди в комбінаціях O. violaceus (L.) О. Е. Schulz. + A. thaliana L. і О. violaceus (L.) О. Е. Schulz. + гібрид (В. juncea (L.) Czern. & Coss + + A. thaliana L.). Гібридну природу одержаних рослин доведено за допомогою аналізу ізоферментів та ПЛР-ПДРФ. Арабідопсис був трансформований вектором, який містив гетерологічну систему транспозонів Spm/dSpm, гени nptll, bar, gus, що дало змогу дослідити поведінку трансгенних ознак у гібридах ди- та тетрагеномного походження. Гібридні рослини були подібними до одного з батьківських видів (О. violaceus + A. thaliana) або мали проміжну морфологію (О. violaceus + гібрид (В. juncea + A. thaliana)). Усі отримані рослини виявилися стійкими до канаміцин-сульфату і фосфінотрицину завдяки перенесеним від А. thaliana трансгенам. Активність β-глюкуронідази виявлено в гібриді О. violaceus + A. thaliana і не знайдено в рослинах О. violaceus + гібрид (В. juncea + A. thaliana). ПЛР-методом показано збереження усіх трансгенів у гібридах.

В результате соматической гибридизации получены межтрибные гибриды в комбинациях О. violaceus (L.) О. Е. Schulz. + А. thaliana L. и О. violaceus (L.) О. Е. Schulz. + гибрид (В. juncea (L) Czern. & Coss + A. thaliana L). Гибридная природа получен­ ных растений доказана с помощью ПЦР-ПДРФ и изоферментного анализа. Арабидопсис был трансформирован вектором, содержащим гетерологичную систему транспозонов Spm/dSpm, гены nptll, bar, gus, что дало возможность иссле­довать поведение трансгенных признаков в гибридах ди- и тетрагеномного происхождения. Гибридные растения были похожи на один из родительских видов (О. violaceus + A. tha­liana) либо имели промежуточную морфологию (О. viotacea + гибрид (В. juncea + A. thaliana)). Все полученные растения оказались устойчивыми к канамицин-сульфату и фосфинотрицину благодаря перенесенным от A. thaliana трансгенам. Активность β-глюкуронидазы обнаружена в гибриде О. vio­laceus + A. thaliana и отсутствовала в растениях О. vio­laceus + гибрид (В. juncea + A. thaliana). ПЦР методом выявле­на сохранность всех трансгенов в гибридах.

Intertribal hybrids in the combinations of Orychophragmus violaceus (L.) O. E. Schulz. + Arabidopsis thaliana L. and O. violaceus (L.) O. E. Schulz. + hybrid (Brassica juncea (L.) Czern. & Coss + A. thaliana L.) were obtained as a result of somatic hybridization. Hybrid nature of the plants obtained was confirmed by the PCRRFLP and analysis of isozymes. A. thaliana L. plants were transformed with a vector carrying heterologous transposable ele­ment SpmldSpm and genes nptll, bar, gus, which allowed to examine the behavior of transgenic traits in digenomic and tetragenomic hybrids. The hybrid plants were similar to one of the parental species (O. violaceus + A. thaliana) or had intermediate morphology (O. violaceus + hybrid (B. juncea + A. thaliana)). All the plants obtained were resistant to kanamycin and phosphinothricin due to the transgenes transferred from A. thaliana The activity of β-glucuronidase was detected in hybrid O. violaceus + + A. thaliana while it was absent in the plants O. violaceus + hybrid (B. juncea + A. thaliana). PCR analysis revealed maintenance of all transgenes in the hybrids.