Субстратная специфичность уридин- и уриннуклеозидфосфорилаз в составе целых клеток Escherichia coli

Abstract

Изучена субстратная специфичность уридинфосфорилазы и пуриннуклеозидфосфорилазы в составе целых клеток Е. coli БМ-11 на примере фосфоролиза ряда аналогов уридина и синтеза соответствующих аналогов аденозина. Показано, что наиболее существенные изменения активности указанных ферментов вызывают модификации при С-3'-атоме углеводного фрагмента уридина и аналогичные изменения в структуре рибофуранозо-1- фосфата.

Вивчено субстратну специфічність уридинфосфорилази і пуриннуклеозидфосфорилази у складі цілих клітин Е. coli БМ-11 на прикладі фосфоролізу низки аналогів уридину та синтезу відповідних аналогів аденозину. Показано, що найсуттєвіші зміни активності зазначених ферментів викликають модифікації при С-3'-атомі вуглеводного фрагмента уридину та аналогічні зміни в структурі рибофуранозо-1-фосфату.

Substrate specificity of uridine and purine nucleoside phosphorylases of the whole cells of Escherichia coli BM-11 has been studied monitoring phosphorolysis of uridine and a series of its analogues modified in the carbohydrate moiety to uracil and pentofuranose-I-phosphate, and synthesis of corresponding adenine nucleosides. Both enzymes reveal similar requirements to the structure and stereochemistry of uracil nucleosides and of the pentofuranose-1-phosphates, respectively, namely: a) modifications at C-3' decrease the substrate activity to a greater extent as compared with the same modifications at C-2'; the order of substrate activity in the case of modifications at C-2' and C-3' is OH> H> NH2> OH-ara (xylo)» 2'(3')-C-methyl; b) substitution of a methyl group for one of the protons at carbon atom of 5'-CH₂OH group does not lead to an essential alterations of the substrate activity in such analogues in comparison with the natural substrates — uridine and ribofuranose-1-phosphate, respectively.