Количественное определение индольных алкалоидов в культивируемых клетках раувольфии с использованием микроколоночной хроматографии

Abstract

Подобраны условия разделения и разработан метод определения индольных алкалоидов на микроколоночном хроматографе «Милихром» с использованием колонки с силикагелем при градиентном режиме элюирования. Разработанный метод позволяет проводить в экстракте культуры тканей раувольфии одновременное количественное определение некоторых из них. Осуществлен анализ различных клеточных линий раувольфии. В культивируемых клетках обнаружено около 30 различных алкалоидов и определено содержание аймалицина, резерпина, вомиленина, аймалина и серпентина. Метод требует малого количества анализируемого образца, отличается высокой точностью и большой скоростью проведения анализа.

Підібрано умови поділу та розроблено метод визначення індольних алкалоїдів на мікроколоночному хроматографі «Міліхром » з використанням колонки з силікагелем при градієнтному режимі елюювання. Розроблений метод дозволяє проводити в екстракті культури тканин раувольфії одночасне кількісне визначення деяких з них. Здійснено аналіз різних клітинних ліній раувольфии. У культивованих клітинах виявлено близько 30 різних алкалоїдів і визначено вміст аймаліцину, резерпіну, воміленіну, аймаліну і серпентину. Метод потребує малої кількості аналізованого зразка, відрізняється високою точністю і великою швидкістю проведення аналізу.

The separation conditions and method of indole alkaloid analysis on silica gel using gradient elution were elaborated by microcolumn chromatograph «Milichrom». The developed method permits carrying out simultaneous quantitative determination of ajmalicine, reserpine, vomilenine, ajmaline and serpentine in the tissue culture extract. Various Rauwolfia cell lines have been analyzed. About 30 different alkaloids were detected and contents of ajmalicine, reserpine, vomilenine, ajmaline and serpentine were measured in the cultured cells. The method requires a small amount of material to be analyzed (1 μl of 0.5% alkaloid solution for one measurement) and it is characterized by high precision and high rate of analysis.