Mouse embryonic fibroblasts expressing IFNβ or IL-21 inhibit proliferation of melanoma cells in vitro

Abstract

Aim. To study an influence of mouse embryonic fibroblasts (C57Fb) transduced with baculovirus vectors (BVs), encoding genes for murine Ifn-β or human IL21, on survival and proliferation of the malignant mouse melanoma cells (B16) in vitro. Methods. Transduction of cells, construction of BVs, RNA isolation, quantitative PCR. Results. We have shown that the normal C57Fb and B16 tumor cells are sensitive to the anti-proliferative effect of IFNβ. Rapidly proliferating B16 cells were the most sensitive. BV ensured a stable expression of Ifnβ mRNA for 5 days in C57Fb/IFNβ cells. The growth of B16 cells was suppressed upon co-cultivation with C57Fb/IFNβ or C57Fb/IL21 cells. Conclusions. IFNβ and IL-21 synthesized by the mouse embryonic fibroblasts transduced with BVs carrying the Ifnβ or IL-21genes inhibited proliferation of B16 melanoma cells in vitro.

Мета. Вивчення впливу ембріональних фібробластів миші (C57Fb), трансдукованих бакуловірусними векторами (БВ), що містять гени мишачого Ifnβ або IL-21 людини, на виживаність і проліферацію злоякісних клітин меланоми миші (B16) in vitro. Методи. Трансдукція клітин, конструювання БВ, виділення РНК, кількісна ПЛР. Результати. Показано, що до антипроліферативного ефекту IFNβ виявилися чутливими всі досліджувані клітини як нормальні C57Fb, так і пухлинні B16; максимальну чутливість мали клітини B16, які швидко діляться. БВ забезпечували стабільну експресію гена Ifnβ на рівні мРНК протягом 5 діб в клітинах C57Fb/IFNβ. Проліферація клітин B16 пригнічувалася при сумісному культивуванні з C57Fb/IFNβ або C57Fb/IL21 клітинами. Висновки. IFNβ і IL-21, синтезовані ембріональними фібробластами С57Fb, трансдукованими БВ з генами Ifnβ або IL-21 інгібували проліферацію клітин В16 при їх сумісному культивуванні in vitro.

Цель. Изучение влияния эмбриональных фибробластов мыши (C57Fb), трансдуцированных бакуловирусными векторами (БВ), содержащими гены мышиного Ifnβ или IL-21 человека, на выживаемость и пролиферацию злокачественных клеток меланомы мыши (В16) in vitro. Методы. Трансдукция клеток, конструирование БВ, выделение РНК, количественная ПЦР. Результаты. Показано, что к антипролиферативному эффекту IFNβ оказались чувствительными все исследуемые клетки как нормальные C57Fb, так и опухолевые B16; максимальной чувствительностью обладали быстро делящиеся клетки B16. БВ обеспечивали стабильную экспрессию гена Ifnβ на уровне мРНК в течение 5 суток в клетках C57Fb/IFNβ. Пролиферация клеток B16 подавлялась при со-культивировании с C57Fb/IFNβ или C57Fb/IL21 клетками. Выводы. IFNβ и IL-21, синтезируемые мышиными эмбриональными фибробластами, трансдуцированными БВ с генами Ifnβ или IL-21 ингибировали пролиферацию клеток меланомы В16 in vitro.