Molecular-genetic characterization of Ukrainian patients with mucopolysaccharidosis IIIA: identification of three new mutations in the heparan-N-sulfatase gene

Abstract

Mucopolysaccharidosis type III or Sanfilippo syndrome (MIM # 252900) is a rare hereditary autosomal-recessive metabolic disorder, which occurs due to the deficiency of heparan-N-sulfatase enzyme (EC 3.10.1.1). Aim. To identify the whole spectrum of mutations in SGSH gene in Ukrainian patients with MPS III A. Methods. RFLP-analysis, SSCP method, sequencing. Results. We have identified 100 % (42/42) mutant alleles of SGSH gene in 23 patients (two probands had siblings with identical genotypes) with MPS III A from 21 Ukrainian family. The range of mutations in SGSH gene in Ukrainian patients with MPS III A is represented with 7 known missence-mutations , R74C, R245H, T271M, E292K, S298P, E369K, N389K and 2 single nucleotide deletions, c.1080delC and c.1135delG. We identified three new mutations in the SGSH gene: a missence-mutation G149R,a deletion c.216delC, and a deletion of 27 bp TCC^348CTCctgccggcgctggaggccgagcccctcTGGGCCACC. Conclusions. The data obtained may be useful for molecular-genetic analysis of Ukrainian patients with MPS III A.

Мукополісахаридоз ІІІ А типу або синдром Санфіліппо А (MIM # 252900) – рідкісне спадкове аутосомно-рецесивне метаболічне захворювання, яке виникає внаслідок дефекту ферменту гепаран–N–сульфатази (ЕС 3.10.1.1). Мета. Виявлення повного спектру мутацій в гені SGSH у пацієнтів з МПС ІІІ А з України. Методи. ПДРФ-аналіз, метод SSCP, метод прямого автоматичного секвенування по Сенгеру на аналізаторі ABI 3130 (Applied Biosystems). Результати. На підставі проведених нами досліджень було ідентифіковано 100 % (42/42) мутантних алелів гену SGSH серед 23 хворих (два пробанди мали сібсів з ідентичними генотипами) на МПС ІІІ А пацієнтів з 21 родини з України. Спектр мутацій в гені SGSH у пацієнтів з МПС ІІІА в Україні представлений відомими 7 місенс-мутаціями – R74C, R245H, T271M, E292K, S298P, E369K, N389K та 2 однонуклеотидними делеціями – с.1080delС і c.1135delG. Нами було знайдено три нових мутації в гені SGSH: місенс-мутація G149R, делеція с.216delC, та делеція 27 п.н. TCC^348CTCctgccggcgctggaggccgagcccctcTGGGCCACC. Висновки. Дані проведеного молекулярно-генетичного аналізу мутацій в гені SGSH можуть бути використані при плануванні найбільш раціонального алгоритму молекулярно-генетичного аналізу пацієнтів з МПС ІІІ А в Україні.

Мукополисахаридоз ІІІ А типа или синдром Санфилиппо А (MIM # 252900) – редкое наследственное аутосомно-рецессивное метаболическое заболевание, которое возникает вследствие дефекта фермента гепаран-N-сульфатазы (ЕС 3.10.1.1). Цель. Выявление полного спектра мутаций в гене SGSH у пациентов с МПС III А из Украины. Методы. ПДРФ-анализ, метод SSCP, метод прямого автоматического секвенирования по Сенгеру на анализаторе ABI 3130 (Applied Biosystems). Результаты. На основании проведенных нами исследований было идентифицировано 100 % (42/42) мутантных аллелей гена SGSH среди 23 пациентов (два пробанда имели сибсов с идентичными генотипами) c МПС III А из 21 семьи из Украины. Спектр мутаций в гене SGSH у пациентов с МПС III А в Украине представлен известными 7 миссенс-мутациями – R74C, R245H, T271M, E292K, S298P, E369K, N389K и 2 однонуклеотидных делециями – с.1080delС и c.1135delG. Нами было найдено три новых мутации в гене SGSH: миссенс-мутация G149R, делеция с.216delC, и делеция 27 п.н. TCC^348CTCctgccggcgctggaggccgagcccctcTGGGCCACC. Выводы. Данные проведенного молекулярно-генетического анализа мутаций в гене SGSH могут быть использованы при планировании наиболее рационального алгоритма молекулярно-генетического анализа пациентов с МПС III А в Украине.