Вплив бета-дефенсину-2 людини на експресію транскрипційних факторів у злоякісно трансформованих лініях клітин В-лімфоцитарного походження

Abstract

Мета: дослідити вплив рекомбінантного бета-дефенсину-2 людини (hBD-2) на рівень експресії мРНК транскрипційних факторів (ТФ) у злоякісно трансформованих лініях клітин В-лімфоцитарного походження, а також з’ясувати можливість регуляції експресії hBD-2 через поверхневі рецептори цих клітин. Об’єкт і методи: в експериментах in vitro були використані злоякісно трансформовані лінії клітин людини В-лімфоцитарного походження, В-лімфобластоїдні лінії клітин та hBD-2. Визначення рівня експресії мРНК ТФ та hBD-2 проводили за допомогою кількісної полімеразної ланцюгової реакції у режимі реального часу. Результати: у цій роботі вперше показано вплив hBD-2 на рівень експресії мРНК ключових ТФ, необхідних для диференціювання В-лімфоцитів, причому ефект hBD-2 залежав від вихідного профілю експресії ТФ у клітинних лініях. Виявлено, що в лінії клітин BJAB бетадефенсин-2 виступає негативним регулятором ТФ IRF4 та BLIMP-1, які функціонують як основні координатори термінальної стадії диференціювання В-лімфоцитів— стадії плазматичних клітин. Улінії клітин Raji внаслідок дії hBD-2 відмічено зниження експресії лише одного ТФ — IRF4, в той час як у В-лімфобластоїдній лінії клітин Т5–1 при дії hBD-2 рівень ТФ не змінювався. Виявлено, що в В-лімфоцитах рівень експресії hBD-2 може регулюватися із залученням поверхневих рецепторів: чи то негативно через BCR в клітинах Raji, чи то позитивно через CD40 рецептор у клітинах Т5–1, але не залежить від сигналювання через CD150. Висновок: показано потенційну роль hBD-2 в регуляції експресії мРНК ТФ у злоякісно трансформованих лініях клітин В-лімфоцитарного походження, атакож можливість регуляції експресії hBD-2 через поверхневі рецептори цих клітин.

Aim: to study the effect of recombinant human beta-defensin-2 (hBD-2) on the level of mRNA expression of key transcription factors (TF) in malignant cell lines of B-lymphocyte origin, and to test the involvement of cell surface receptors in regulation of hBD-2 expression. Object and methods: malignant cell lines of B-lymphocyte origin, В-lymphoblastoid cell lines and recombinant hBD-2 have been used in experimentsin vitro. The level of mRNA expression of TF and hBD-2 was evaluated using real-time polymerase chain reaction. Results: for the first time the effect of hBD-2 on the level of mRNA expression of key TF required for differentiation of B-lymphocytes was demonstrated. Moreover, the effect of hBD-2 was dependent on initial profile of TF expression in these cell lines. It was shown that in BJAB cell line IRF4 and BLIMP-1, the major coordinators of terminal differentiation of B-lymphocytes to the stage of plasma cells, were negatively regulated by hBD-2. Incubation of Raji cell line with hBD-2 resulted in decreased expression of just one TF, IRF4, while in lymphoblastoid Т5–1 cell line treated with hBD-2 the level of TFs remained unaltered. It was revealed that in B-lymphocytes the level of hBD-2 expression could be regulated with the involvement of surface receptors: negatively through BCR in Raji cells, or positively through CD40 receptor in Т5–1 cells, but was not dependent on CD150 signaling. Conclusion: the study highlighted a potential role of hBD-2 in regulation of the level of mRNA expression of TFs in malignant cell lines of B-lymphocyte origin, and possible regulation of hBD-2 expression through surface receptors in these cells.