Амінокислотний профіль середовищ співкультивування доімплантаційних ембріонів людини in vitro на моношарі свіжовиділених або кріоконсервованих клітин кумулюса та гранульози

Abstract

При співкультивуванні з клітинами кумулюса та гранульози (КГК) створюється мікрооточення, яке може забезпечити нормальний ріст та розвиток доімплантаційних ембріонів людини in vitro. Визначення кількісного та якісного складу такого середовища має важливе значення під час створення систем культивування ембріонів людини in vitro. У роботі використовували ембріони людини п'ятої доби розвитку (стадія бластоцисти), моношарові культури свіжовиділених та кріоконсервованих КГК. Досліджували вплив культивування на моношаровій культурі свіжовиділених та кріоконсервованих КГК на морфокинетичні характеристики доімплантаційних ембріонів людини, отриманих in vitro, та амінокислотний профіль середовищ культивування. Встановлено, що кріоконсервування не впливає на здатність КГК підтримувати розвиток доімплантаційних ембріонів та покращує їх якість. Визначено відмінність амінокислотного складу стандартного середовища та середовищ співкультивування на моношарі нативної або кріоконсервованої культури кумулюса та гранульози. Присутність клітин КГК змінює біохімічний профіль cередовища культивування за рахунок підвищення вмісту таких амінокислот, як триптофан, пролін, валін, орнітин та глутамін.

При сокультивировании с клетками кумулюса и гранулезы (КГК) создается микроокружение, которое может обеспечить нормальный рост и развитие доимплантационных эмбрионов человека in vitro. Определение количественного и качественного состава такой среды имеет важное значение при создании систем культивирования эмбрионов человека in vitro. В работе использовали эмбрионы человека на пятые сутки развития (стадия бластоцисты), монослой культуры свежевыделенных и криоконсервированных КГК. Исследовали влияние культивирования на монослойной культуре свежевыделенных и криоконсервированных КГК на морфокинетические характеристики доимплантационных эмбрионов человека, полученных in vitrо, и аминокислотный профиль сред культивирования. Установлено, что криоконсервирование не влияет на способность КГК поддерживать развитие доимплантационных эмбрионов и улучшает их качество. Определены отличия аминокислотного состава стандартной среды и среды сокультивирования на монослое нативной или криоконсервированной культуры кумулюса и гранулезы. Присутствие клеток КГК изменяет биохимический профиль cреды культивирования за счет повышения содержания таких аминокислот, как триптофан, пролин, валин, орнитин и глутамин.

Co-culturing with the cumulus and granulosa cells (CGC) provide a microenvironment which can ensure the normal growth and development of human pre-implantation embryos in vitro. Examining the quantitative and qualitative compositions of this environment is of an important value to produce the systems to culture human embryos in vitro. The paper described the human embryos of the fifth day of development (blastocyst stage), monolayer culture of cryopreserved and freshly isolated CGC. We investigated the influence of culturing on monolayer of freshly isolated and cryopreserved CGC on morphokinetic characteristics of human pre-implantation embryos obtained in vitro as well as the amino acid profile of the culturing media. It has been found that cryopreservation does not affect the ability of CGC to support the development of pre-implantation embryos and improves their quality. There was determined the difference in amino acid composition of the standard medium of those for co-culturing on monolayer of either native or cryopreserved culture and cumulus granulosa. The presence of CGC changes the biochemical profile of culturing medium by increasing the content of the amino acids such as tryptophan, proline, valine, ornithine and glutamine.