Влияние криоконсервирования на иммунологическую активность и фенотипический состав лимфоидных клеток эмбриональной печени человека

Abstract

Исследовали фенотип свежевыделенных и криоконсервированных клеток эмбриональной печени (КЭП) человека, а также их способность вызывать иммунный ответ лимфоцитов взрослых доноров (ЛВД) при сокультивировании. Данные проточной цитометрии не позволили выявить достоверной экспрессии маркеров лимфоидной коммитации (CD1⁺, CD10⁺, CD5⁺, CD20⁺) и показали, что содержание CD7⁺ и CD13⁺ клеток в эмбриональной печени незначительно (менее 1%). В наибольшей степени в свежевыделенных и криоконсервированных суспензиях представлены CD45⁺ (2,65±0,32%) и HLADR⁺ (7,51±1,35%) клетки. Низкое содержание лимфоидных клеток сопровождалось слабой иммуногенной активностью клеток печени, исследованной в смешанной культуре лимфоцитов (СКЛ). Криоконсервирование позволяет сохранить пролиферативную активность КЭП человека и не влияет на её фенотип и иммунологическую активность.

Досліджували фенотип свіжоізольованих і кріоконсервованих клітин ембріональної печінки людини, а також їх здатність викликати імунну відповідь лімфоцитів дорослих донорів при сокультивуванні.Дані проточної цитометрії не дозволили виявити вірогідної експресії маркерів лімфоїдної комітації (CD1⁺, CD10⁺, CD5⁺, CD20⁺) і показали, що вміст CD7⁺ та CD13⁺ клітин у ембріональній печінці незначний (менше ніж 1%). Найбільше в свіжоізольованих і кріоконсервованих суспензіях представлені CD45⁺ (2,65±0,32%) і HLA-DR⁺ (7,51±1,35%) клітини. Низький вміст лімфоїдних клітин супроводжувався слабкою імуногенною активністю клітин печінки, що була досліджена у змішаній культурі лімфоцитів. Кріоконсервування дозволяє зберегти проліферативну активність клітин ембріональної печінки людини і не впливає на її фенотип та імунологічну активність.

Authors studied the phenotype of freshly isolated and cryopreserved cells from human embryonic liver (HEL), and its capability to provoke an immune response of adult donor lymphocytes (ADL) during co-culturing. Flow cytometry data did not allow to reveal the statistically significant expression of lymphoid commitance markers (CD1⁺, CD10⁺, CD5⁺, CD20⁺) and showed the insignificant content of CD7⁺ and CD13⁺ cells in embryonic liver (less than 1%). In freshly isolated and cryopreserved suspensions the CD45⁺ and HLA-DR⁺ cells are presented in the greatest extent (2.65±0.32% and 7.51±1.35%, correspondingly). Low content of lymphoid cells was accompanied by poor immunogenic activity of liver cells, studied in mixed lymphocyte culture (MLC). Cryopreservation allows to keep the proliferative activity of HEL cells, and does not influence its phenotype and immunological activity.