Insertion intermediate of annexin B12 is prone to aggregation on membrane interfaces

Abstract

Annexin B12 (ANX) is known to insert across the lipid bilayer at acidic pH in the absence of Ca²⁺ and to form a pore-like structure consisting of several transmembrane helices, most of which are unknown. Our previous studies demonstrate that the insertion proceeds via an interfacial refolded intermediate state, which can be stabilized by anionic lipids. Energy transfer measurements in a mixture of donor- and acceptor-labeled ANX indicate that this interfacial intermediate, unlike the final transmembrane conformation, is prone to aggregation. Such aggregation of a non-inserted ANX may have implications for a possible general mechanism of misfolding of membrane proteins.

Відомо, що анексин В12 (ANX) вбудовується в ліпідний бішар при кислих рН у відсутності Са²⁺ та утворює пороподібну структуру, яка складається з кількох трансмембранних спіралей, більшість з яких невідома. Наші попередні дослідження показали, що вбудовування відбувається за участі поверхневого фолдингового інтермедіату, що може бути стабілізованим аніонними ліпідами. Виміри переносу енергії в суміші ANX, міченого донором та акцептором, вказують на те, що цей поверхневий інтермедіат, але не кінцева трансмембранна конформація, є схильний до агрегації. Ця агрегація невбудованого ANX може мати наслідки для можливого загального механізму місфолдингу мембранних білків

Известно, что аннексин В12 (ANX) встраивается в липидный бислой при кислых рН в отсутствие Са²⁺ и образует пороподобную структуру, состоящую из нескольких трансмембранных спиралей, большинство из которых неизвестно. Наши предшествующие исследования показали, что встраивание происходит посредством поверхностного фолдингового интермедиата, стабилизируемого анионными липидами. Измерения переноса энергии в смеси ANX, меченного донором и акцептором, указывают на то, что этот поверхностный интермедиат, но не конечная трансмембранная конформация, подвержден агрегации. Такая агрегация невстроенного ANX может иметь последствия для возможного общего механизма мисфолдинга мембранных белков.