Перенос и транзиторная экспрессия гена тимидинкиназы HSV-I в составе реконструированных вирусоподобных и нуклеопротеидных комплексов в клетках печени

Abstract

Ген тимидинкиназы (tk) вируса HSV-I включен в преформированную капсиду вируса полиомы и в составе полученных стабильных искусственных вирусоподобных частиц (ИВЧ) внутривенно введен крысам весом 30 г. Проведен электрофоретический анализ индуцированной в клетках печени активности tk HSV-I. Одновременно проведен гибридизационный (по Саузерну) анализ ДНК целых клеток и очищенных ядер гепатоцитов, эндотелиальных и Купферовских клеток для выявления гена tk HSV-I. Полученный результат свидетельствует, что ИВЧ по сравнению с Са-преципитатом и нуклеопротеидными комплексами более эффективны в переносе in vivo гена tk в ядра печени и в индукции выраженной транзиторной активности tk. Глюкокортикоиды ингибируют транспорт изученных комплексов в эндотелиальные, Купферовские клетки и стимулируют их транспорт в гепатоциты.

Ген тимідинкінази (tk) вірусу HSV-I включений у преформовану капсиду вірусу поліоми і в складі отриманих стабільних штучних вірусоподібних частинок (ІВЧ) внутрішньовенно введений щурам масою 30 г. Проведено електрофоретичний аналіз індукованої в клітинах печінки активності tk HSV-I. Одночасно проведено гібридизаційний (за Саузерном) аналіз ДНК цілих клітин і очищених ядер гепатоцитів, ендотеліальних і Купферовських клітин для виявлення гена tk HSV-I. Отриманий результат свідчить, що ІВЧ порівняно з Са-преципітатом і нуклеопротеїдними комплексами більш ефективні у перенесенні in vivo гена tk в ядра печінки і в індукції вираженої транзиторної активності tk. Глюкокортикоїди інгібують транспорт вивчених комплексів в ендотеліальні, Купферовські клітини і стимулюють їхній транспорт у гепатоцити.

The thymidine kinase gene (tk) of HSV-I is included into the preformed empty capsid of the polyoma virus and in the composition of the obtained stable artificial polyoma-like particles (PLP) is intravenously injected into rats weighing 30 g. Electrophoretic profile of the induced HSV-I tk activity in the liver cells has been investigated. The Southern hybridization analysis of DNA from the whole cells and purified nuclei of hepatocytes, endothelial and Kupffer cells is carried out to reveal gene tk HSV-I. The results obtained indicate that PLP are more effective than Ca-precipitate and nucleoprotein complexes in tk gene transfer in vivo into the liver cells and in the transitory expression of the HSV-I tk-activity. Glucocorticoids stimulate transfer of tk gene into hepatocytes and inhibit its transfer into endothelial and Kupffer cells of the liver.