Экспрессивный бакуловирусный вектор на основе вируса ядерного полиэдроза кольчатого шелкопряда Malacosoma neustria

Abstract

Ген β-галактозидазы Escherichia coli встроен в рамке считывания в ген полиэдрина вируса ядерного полиэдроза (ВЯП) кольчатого шелкопряда. Котрансфекцией рекомбинантной плазмиды pMPEA-β-gal с ДНК ВЯП M. neustria дикого типа связанный ген был встроен в геном ВЯП M. neustria. Инфицирование культуры клеток тутового шелкопряда Anteraea pemi (MCAp-I) полученным рекомбинантным ВЯП М. neusiria-gal3 выявило высокий уровень экспрессии связанного белка полиэдрин-β-галактозидаза. Синтеза полиэдрина в этих клетках не обнаружено.

Ген β-галактозидази Escherichia coli вбудовано в рамці зчитування у ген поліедрину вірусу ядерного поліедрозу (ВЯП) кільчастого шовкопряда. Котрансфекцією рекомбінантної плазміди pMPEA-β-gal з ДНК ВЯП M. neustria дикого типу зв’язаний ген було вбудовано в геном ВЯП M. neustria. Інфікування культури клітин тутового шовкопряда Anteraea pemi (MCAp-I) отриманим рекомбінантним ВЯП М. neusiria-gal3 виявило високий рівень експресії зв’язаного білка поліедрин-β-галактозидаза. Синтезу поліедрину у цих клітинах не виявлено.

The β-galactosidase gene of E. coli was inserted in phase with coding sequence of the Malacoscma neustria nuclear polyhedrosis virus (MnNPV) polyhedrin gene. The fusion gene was inserted into the MnNPV genome by cotransfection of recombinant plasmid pMPEA-3 gal and wild-type MnNPV DNA. Infection of Antheraea pernyi cells (MCAp-1) by the resulting recombinant MnNPV gal 3 has shown high level of expression of polyhedrin-β-galactosidase fusion protein, no synthesis of polyhedrin being revealed.