Relationship between HPV16/18 E6 and р53, р21waf1, MDM2, Ki67 and cyclin D1 expression in esophageal squamous cell carcinoma: comparative study by using tissue microarray technology

Abstract

Aim: To investigate the role of human papillomavirus (HPV) HPV16/18 E6 oncogene in the carcinogenesis of esophageal cell carcinoma (ESCC). Materials and Methods: Tissue microarray (TMA) block was constructed from 60 cases of paraffin-embedded ESCC tissues and pair-matched controls (adjacent normal epithelium). Immunohistochemistry (IHC) methods were applied to detect the expression of HPV16/18 E6, p53, p21Waf1, MDM2, Ki67 and cyclin D1 proteins on TMA slides. In situ hybridization (ISH) targeting HPV gene was also used. Results: In ESCC samples, 18.3% (11/60) were revealed HPV16/18 E6 positive by IHC, while 40.0% (24/60) HPV positive by ISH; HPV16/18 E6 expression was significantly higher than that of control samples. In ESCC samples, the expressions of p53, p21Waf1, Cyclin D1, MDM2 and Ki67 were recorded in 60.0% (36/60), 40.0% (24/60), 51.7% (31/60), 65.0% (39/60) and 88.3% (53/60) cases respectively, In ESCC samples, p53, MDM2 and Ki67 expression correlated with the HPV16/18 E6 expression (p < 0.01), p21Waf1 expression — with these of MDM2 and cyclin D1 (p < 0.01) whilst expression of Ki67 — with ESCC grade (p < 0.01). Conclusion: HPV might be one of etiological factor of esophageal carcinoma in Shantou, China. p53, MDM2 proteins may play important roles in the pathogenesis of HPV-associated ESCC.

Цель: исследовать роль онкогена HPV16/18 E6 вируса папилломы человека (HPV) в развитии плоскоклеточной карциномы пищевода (ESCC). Материалы и методы: исследованы 60 образцов ESCC и контрольные образцы нетрансформированной ткани (парафиновые блоки). Для выявления экспрессии белков HPV16/18 E6, p53, p21Waf1, MDM2, Ki67 и циклина D1 в срезах для тканевых микрочипов (tissue microarray, TMA) применен метод иммуногистохимии (IHC), для определения экспрессии генов HPV применяли гибридизацию in situ (ISH). Результаты: методами IHC, экспрессия HPV16/18 E6 выявлена в 18,3% (11/60) случаев ESCC, в то время как по результатам метода ISH, 40,0% (24/60) образцов признаны HPV-позитивными. В образ­цах ESCC экспрессия p53, p21Waf1, циклина D1, MDM2 и Ki67 выявлена в 60,0% (36/60), 40,0% (24/60), 51,7% (31/60), 65,0% (39/60) и 88,3% (53/60) случаев соответ­ственно, причем экспрессия p53, MDM2 и Ki67 коррелировала с экспрессией HPV16/18 E6 (p < 0,01), экспрессия p21Waf1 — с таковой MDM2 и циклина D1, а экспрессия Ki67 — со стадией развития опухоли (p < 0.01). Выводы: HPV может являться одним из этиологических факторов развития рака пищевода в провинции Шанту, Китай. Белки p53 и MDM2 могут принимать участие в патогенезе плоскоклеточного рака пищевода, ассоциированного с вирусом папилломатоза.