Вiopolymers and Cell, 2017, № 1
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/151261
2024-03-29T14:56:59ZSpreading and proliferation of cultured rat bone marrow stromal cells on the surface of bioactive glass ceramics
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/152891
Spreading and proliferation of cultured rat bone marrow stromal cells on the surface of bioactive glass ceramics
Kiroshka, V.V.; Savvova, O.V.; Bozhkova, Yu.O.; Tamarina, I.V.; Fesenko, A.I.
Aim. To study spreading profile, cytoskeleton organization and proliferation of bone marrow stromal cells upon cultivation on the glass-crystalline material (GCM) surfaces with different chemical composition and solubility. Methods. GCMs with different CaO: P₂O₅ ratios were used. Actin cytoskeleton in cells was visualized using fluorescent TRITC-conjugated phalloidin. Cell proliferation was studied using MTT test. Results. Cell cultivation on highly soluble B-series GCM (Ca/P=5) led to appearance of fibroblast-like cells; their actin cytoskeleton filaments were uniformly distributed within the cytoplasm. In this case, proliferation dynamics was similar to that under cultivation on plastic. Cultivation on A and C series of GCM with a reduced Ca/P (1.4–2.58) resulted in a decrease of cell spreading and their proliferation index (up to 2–3 times) relative to the control. Conclusions. The material solubility and Ca/P superficial ratio are the main factors, determining cell interaction with GCMs.; Мета. Дослідити характер розпластування, структурну організацію цитоскелету, проліферацію стромальних клітин кісткового мозку при культивуванні на поверхні склокристалічних матеріалів (СКМ) різних за хімічним складом та розчинністю. Методи. В роботі було використано СКМ з різним співвідношенням CaO/P₂O₅. Структуру актинового цитоскелету клітин було візуалізовано за допомогою фаллоідину, коньюгованого з флуоресцентним барв-ником TRITC. Для оцінки проліферації клітин застосовували МТТ тест. Результати. Культивування клітин на СКМ серії В (атомне співвідношення Ca/P=5 на поверхні), призводило до появи фібробластоподобних форм клітин із рівномірним розташуванням компонентів актинового цитоскелету в усьому обсязі цитоплазми. У цьому випадку динаміка проліферації була аналогічною до такої, як при культивуванні на пластику. Зниження співвідношення Ca/P до 1,4 – 2,58 серій А та С призводило до зменьшення площі розпластування та індекса проліферації (у 2–3 рази) відносно контролю. Висновки. Основними факторами, які визначають поведінку клітин при взаємодії з СКМ, є розчинність матеріалу та співвідношення Ca/P на ростовій поверхні.; Цель. Исследовать характер распластывания, структурную организацию цитоскелета, пролиферацию стромальных клеток костного мозга при культивировании на поверхности стеклокристаллических материалов (СКМ) различных по химическому составу и растворимости. Методы. В работе были использованы СКМ, с различным соотношением CaO/P₂O₅. Структура актинового цитоскелета клеток была визуализирована при помощи фаллоидина, конью-гированного с флуоресцентним красителем TRITC. Для оценки пролиферации использовали МТТ тест. Результаты. Культивирование клеток на СКМ серии В (атомное соотношение Ca/P=5 на поверхности), приводило к появлению фибробластоподобных форм клеток с равномерным расположением филаментов актинового цитоскелета по всему объему цитоплазмы. В этом случае динамика пролиферации была аналогичной таковой при культивировании на пластике. При снижении соотношения Ca/P до 1,4–2,58 на поверхности СКМ серий А и С наблюдалось уменьшение площади распластывания и индекса пролиферации (в 2–3 раза) относительно контроля. Выводы. Основными факторами, определяющими поведение клеток при взаимодействии с СКМ, являются растворимость материала и соотношение Ca/P на ростовой поверхности.
2017-01-01T00:00:00ZAnalysis of mutations in GBA gene in Ukrainian patients with Gaucher disease
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/152889
Analysis of mutations in GBA gene in Ukrainian patients with Gaucher disease
Olkhovych, N.V.; Nedoboy, A.M.; Pichkur, N.O.; Gorovenko, N.H.
Gaucher disease (MIM 230800) is the most common storage disorder, caused by hereditary deficiency of the lysosomal enzyme of glucocerebrosidase (EC 3.2.1.45). Human glucocerebrosidase gene (GBA) is mapped to the 1q21 locus, it is 7.5 kb long and consists of 11 exons. According to human gene mutation databases, there are over 300 currently described pathogenic GBA variants, most of them are related to the development of Gaucher disease. Aim. To identify rearrangements in the GBA gene which conditioned the development of Gaucher disease in Ukrainian patients, to compare their spectrum with the variants in patients from Slavonic and other European countries and to evaluate genotype-phenotype associations for this disease. Methods. The Sanger’s method of direct automated sequencing using ABI 3130 analyzer (Applied Biosystems). Results. We identified 96.8 % of mutant alleles in Ukrainian patients with Gaucher disease. Six new and previously not described rearrangements of the GBA gene were identified. Conclusion. The comparison of genotypes with the linical form of the disease demonstrated that our results agree with the currently recognized genotype-phenotype correlations, which allow predicting the type and clinical course of the Gaucher disease to some degree.; Хвороба Гоше (MIM 230800) є найбільш поширеним захворюванням накопичення, яке спричинене спадковим дефіцитом лізосомного ферменту глюкоцереброзідази (EC 3.2.1.45). Ген глюкоцереброзідази (GBA) картований в локусі 1q21, його довжина 7,5 тис. п. н. і складається з 11 екзонів. За даними найбільших баз даних мутацій генів людини, існує більше 300 описаних в даний час патогенних варіантів гена GBA, більшість з них пов’язані з розвитком хвороби Гоше. Мета. Виявлення перебудов в гені GBA, які зумовили розвиток хвороби Гоше у хворих в Україні, порівняння їх частоти і спектру з варіантами у пацієнтів з інших європейських країн, а також оцінка генотип-фенотип асоціації для цього захворювання. Методи. Метод прямого автоматичного сиквенування за Сенгером на аналізаторі ABI 3130 (Applied Biosystems). Результати. Застосування різних молекулярних і генетичних підходів, включаючи пряме секвенування послідовності гена, дозволило нам ідентифікувати 96,8% мутантних алелів у українських пацієнтів з хворобою Гоше. Також були виявлені шість нових раніше не описаних перебудов послідовності гена GBA. Висновки. Порівняння виявлених у пацієнтів генотипів з клінічною формою захворювання показали, що отримані результати не суперечать сучасним визнаним генотип-фенотип кореляціям, які дозволяють певною мірою прогнозувати тип і клінічний перебіг хвороби Гоше.; Болезнь Гоше (MIM 230800) является наиболее распространенным заболеванием накопления, которое вызвано наследственным дефицитом лизосомного фермента глюкоцереброзидазы (EC 3.2.1.45). Ген глюкоцереброзидазы (GBA) картирован в локусе 1q21, его длина 7,5 тыс. п. н. и состоит из 11 экзонов. По данным крупнейших баз данных мутаций генов человека, существует более 300 описанных в настоящее время патогенных вариантов гена GBA, большинство из них связаны с развитием болезни Гоше. Цель. Выявление перестроек в гене GBA, которые обусловили развитие болезни Гоше у больных в Украине, сравнение их частоты и спектра с вариантами у пациентов из других европейских стран, а также оценки генотип-фенотип ассоциации для этого заболевания. Методы. Метод прямого автоматического секвенирования по Сенгеру на анализаторе ABI 3130 (Applied Biosystems). Результаты. Применение различных молекулярных и генетических подходов, включая прямое секвенирование последовательности гена, позволило нам идентифицировать 96,8% мутантных аллелей у украинских пациентов с болезнью Гоше. Также были обнаружены шесть новых ранее не описанных перестроек последовательности гена GBA. Выводы. Сравнение выявленных у пациентов генотипов с клинической формой заболевания показали, что полученные результаты не противоречат современным признанным генотип-фенотипическим корреляциям, позволяющим в определенной степени прогнозировать тип и клиническое течение болезни Гоше.
2017-01-01T00:00:00ZExperimental and human population studies of DNA lesions in healthy individuals
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/152887
Experimental and human population studies of DNA lesions in healthy individuals
Sjakste, N.
DNA damage is a valuable biomarker in human molecular epidemiology being associated with many diseases. However, the level of DNA damage is influenced also by intrinsic features of healthy individuals: heredity, sex, age and body type. This review summarizes data on DNA breakage level in healthy humans depending on their characteristics and compares these data with experimental studies and observations on animals. Several strains of laboratory animals manifest an increased level of DNA breaks. In humans, some gene polymorphisms are associated with an increased level of DNA damage; however it is believed that environmental factors are more important. In animals, a higher level of DNA breakage is usually detected in males. In humans, data on the role of gender are contradictory and depend on origin. Experimental models provide evidence of increased levels of single- and double-strand breaks in obese animals. Although human studies are less convincing, an increase of double-strand breaks appears to be a more reproducible feature of DNA of overweight persons. Data on single-strand DNA breaks in aged persons are contradictory, but double strand breaks evidently increase with age.; Пошкодження ДНК є інформативним біомаркером для молекулярної епідеміології, так як вони пов'язані з багатьма захворюваннями людини. У той же час рівень пошкоджень ДНК може залежати від внутрішніх властивостей притаманних здоровим людям: спадковості, статі, віку і статури. Метою даного огляду є узагальнення даних щодо розривів ДНК у здорових людей в залежності від їхніх характеристик у порівняння з даними експериментів і спостережень за тваринами. У лабораторних тварин кількох ліній спостерігають підвищений рівень розривів ДНК, у людини - кілька генних поліморфізмів асоційовані з підвищеним рівнем розривів, але вважається, що визначальними є зовнішні фактори. У самців тварин ДНК пошкоджена сильніше, ніж у самиць, дані по людині суперечливі і залежать від раси. Експериментальні моделі показують підвищений рівень одно- і дволанцюгових розривів ДНК при ожирінні. Дані досліджень на людині менш переконливі, краще відтворюються дані щодо підвищеного рівеня дволанцюгових розривів ДНК у людей із зайвою вагою. По одноланцюгових розривах ДНК при старінні дані суперечливі, переконливо показано зростання дволанцюгових розривів ДНК з віком.; Повреждения ДНК являются информативным биомаркером для молекулярной эпидемиологии, так как они связа-ны со многими заболеваниями человека. В то же время уровень повреждений ДНК может зависеть от внутренних свойств, присущих здоровым людям, от наследственности, пола, возраста и телосложения. Целью данного обзора будет обобщение данных о разрывах ДНК у здоровых людей в зависимости от их характеристик и сравнение с данными экспериментов и наблюдений на животных. У лабораторныз животных нескольких линий наблюдают повышенный уровень разрывов ДНК, у людей несколько генных полиморфизмов ассоциированы с повышенным уровнем разрывов, но считается, что определяющими являются внешние факторы. У самцов животных ДНК по-вреждена сильнее, чем у самок, данные по людям противоречивы и зависят от расы. Экспериментальные модели указывают на повышеннй уровень одно- и двунитевых разрывов ДНК при ожирении. Данные исследований на людях менее убедительны, лучше воспроизволдятся данные, указывающие на повышенный уровень двунитевых разрывов ДНК у людей с лишним весом. Данные по однонитевым разрывам ДНК при старении противоречивы, убедительно показано нарастание двунитевых разрывов ДНК с возрастом.
2017-01-01T00:00:00ZRestriction analysis and differentiation of Ukrainian strains of infectious bursal disease virus
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/152886
Restriction analysis and differentiation of Ukrainian strains of infectious bursal disease virus
Pastyria, A.S.; Sobko, I.O.; Polischuk, V.P.
The infectious bursal disease virus (IBDV) had a great influence on poultry industry since emergence of very virulent strains in 1980s. The virus leads to immunosuppression and high mortality. There are many different vaccines against IBDV, so characterization of field strains is needed. Aim. To characterize and differentiate vaccine and field virus strains using restriction analysis. Methods. RNA was extracted using sorption method. After reverse transcription, DNA was amplified using PCR with specific primers to VP2 gene. The obtained amplicons were digested with a set of restriction enzymes (MvaI, MboI, SspI, BspMI, SacI, BstEII). Results. The restriction profile of eight vaccine strains was described and 120 bursa samples from infected birds were analyzed. Most of the analyzed virus isolates had restriction profiles similar to vaccine strains. Vaccine strains belonging to the same group in terms of attenuation had a similar restriction profile. Four field isolates have been classified as vvIBDV. They were differentiated from vaccine strains by the presence of SspI and the absence of BstEII sites. Restriction analysis is appropriate to differentiate vaccine and field IBDV isolates. Conclusion. Our approach can be used to monitor vvIBDV in poultry farms.; Вірус інфекційної бурсальної хвороби (ІБХ) став актуальним для птахівництва з моменту появи високовірулентних штамів в середині 80-х років ХХ ст. Вони призводять до імуносупресивного стану тварин та високої смертності. З огляду на велику різноманітність вакцин, необхідною є харакетристика польових ізолятів, виявлених у господарстві. Мета. Охарактеризувати та диференціювати вакцинні та польові штами вірусу за допомогою методу рестрикційного аналізу. Методи. Виділення РНК здійснювали сорбційним методом, здійснювали постановку зворотної транскрипції та ПЛР із використанням специфічних праймерів до гену VP2. Отримані амплікони піддавали рестрикції MvaI, MboI, SspI, BspMI, SacI, BstEII. Результати. У роботі було охарактеризовано рестрикційний профіль восьми вакцинних штамів та проаналізовано 120 зразків бурс відібраних від уражених вірусом ІБХ птахів. Більшість проаналізованих ізолятів за рестрикційним профілем були подібними до вакцинних штамів. Вакцинні штами, що належали до однієї групи за рівнем атенуації мали одинаковий рестрикціний профіль. Для чотирьох було показано наявність сайтів SspІ та відсутність сайту BstEІІ, що дає підставу віднести їх до високовірулентих штамів вірусу ІБХ. Висновки. Рестрикційний аналіз дає змогу диференціювати вакцинні та польові ізоляти вірусу ІБХ. Даний підхід можна використовувати для моніторингу ситуації на господарстві за даним збудником.; Вирус инфекционной бурсальной болезни (ИББ) стал актуальным для птицеводства с момента появления высоко-вирулентных штаммов в середине 80-гг ХХ в. Они приводят к иммуносупрессивном состоянию животных и высокой смертности. Учитывая большое разнообразие вакцин, необходима харакетристики полевых изолятов, выявленных в хозяйстве. Цель. Охарактеризовать и дифференцировать вакцинные и полевые штаммы вируса с помощью метода рестрикционного анализа. Методы. РНК с образцов экстрагировали сорбционным методом, осуществляли постановку обратной транскрипции и ПЦР с использованием специфических праймеров к гену VP2. Полученные ампликоны подвергали рестрикции MvaI, MboI, SspI, BspMI, SacI, BstEII. Результаты. В работе были охарактеризованы рестрикционные профили 8 вакцинных штаммов и проанализированы 120 образцов бурс отобранных от пораженных вирусом ИБХ птиц. Большинство проанализированных изолятов за рестрикционым профилем были подобны вакцинным штаммам. Вакцинные штаммы, принадлежащие к одной группе по уровню аттенуации имели одинаковый рестрикционный профиль. Для четырех изолятов было показано наличие сайтов SspI и отсутствие сайта BstEII, что дает основание отнести их к высоковирулентым штаммам вируса ИББ. Выводы. Рестрикционный анализ позволяет дифференцировать вакцинные и полевые изоляты вируса ИББ. Данный подход можно использовать для мониторинга ситуации в хозяйстве по данному возбудителю.
2017-01-01T00:00:00Z