Вiopolymers and Cell, 2015, № 6
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/151251
2024-03-28T15:03:32ZStudy of antiviral activity of a new plant origin preparation neoflazidum on a model of the hepatitis C virus
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/152702
Study of antiviral activity of a new plant origin preparation neoflazidum on a model of the hepatitis C virus
Porva, Yu.I.; Rybalko, S.L.; Palchykovs’ka, L.I.; Atamanyuk, V.P.
Aim. Investigation of antiviral activity of a new plant origin preparation – neoflazidum, a form of proteflazidum Methods. A model of hepatitis C virus-producing Jurkat cell culture (JurkatHCV) which has been previously transfected with complementary DNA preparations isolated from different types of hepatitis C virus (HCV). Results.To obtain these preparations, HCV RNA preparations were isolated from viral material of HCV-diseased patients, the transfecting agent Turbofect being used. The cytotoxic dose (CD50) was shown to be 37.2 μg/ml, the effective dose (ED50) being 0.46 μg/ml for the HCV type 3a; this dose, however, was as high as 3.7 μg/ml when neoflazidum had been tested for HCV type 1b. Therefore, the selectivity index for the HCV type 3a reached 80.8 in the JurkatHCV-3a cell system, being as low as 10.0 for the HCV type 1b. Conclusion. Using a model system RNAP T7, the antiviral neoflazidum activity was demonstrated to be realized due to interferons α- and γ-induction and RNA synthesis inhibition.; Мета. Вивчення антивірусної активності нової форми рослинного екстракту Протефлазіду (РЕП) – Методи. Моделі продукуючої культури Jurkat кДНК ВГС. Результати. Одержані продукуючі ВГС культури клітин Jurkat методом трансфекції комплементарної ДНК до виділеної РНК ВГС від хворих гепатитом С за допомогою трансфекуючого реагента Turbofect. Цитотоксична доза (CD50) дорівнювала 37,2 мкг/мл, ефективна доза (ED50) в системі продукції вірусу гепатиту С 3а типу дорівнювала 2,3 мкг/мл, а в системі репродукції вірусу гепатиту С 1в типу – 18,6 мкг/мл. Тому індекс селективності для РЕП в системі продукуючих ВГС клітин 3а типу дорівнював 16,2, а для ВГС 1в типу – 2. Висновки. Механізм антивірусної дії РЕП відбувається за рахунок індукції α- та γ-інтерферону та інгібіції синтезу РНК в модельній системі РНКП Т7 – інгібуюча концентрація (IC50) – 0,78 мкг/мл.; Цель. Изученить антивирусную активности новой формы растительного экстракта Протефлазида (РЭП). Методы. Модель продуцируемого культуры Jurkat кДНК ВГС. Результаты. Полученные продуцирующие ВГС культуры клеток Jurkat методом трансфекции комплементарной ДНК к выделенной РНК ВГС от больных гепатитом С с помощью трансфецирующего реагента Turbofect. Цитотоксическое доза (CD50) равнялась 37,2 мкг / мл, эффективная доза (ED50) в системе продукции вируса гепатита С 3а типа равна 2,3 мкг / мл, а в системе репродукции вируса гепатита С 1в типа – 18,6 мкг / мл. Поэтому индекс селективности для РЭП в системе продуцирующих ВГС клеток 3а типа равен 16,2, а для ВГС 1в типа – 2. Выводы. Механизм антивирусного действия РЭП происходит за счет индукции α- и γ-интерферона и ингибирования синтеза РНК в модельной системе РНКП Т7 – ингибирующая концентрация (IC50) – 0,78 мкг / мл.
2015-01-01T00:00:00ZHeterogeneity of premetastatic niches gene expression in breast cancer cells
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/152701
Heterogeneity of premetastatic niches gene expression in breast cancer cells
Tashireva, L.A.; Denisov, E.V.; Savelieva, O.E.; Geraschenko, T.S.; Zavyalova, M.V.; Perelmuter, V.M.
Aim. To investigate the expression of the genes TGFB1, TNF, CSF1, CSF2, VEGFA and HIF1A in the patients with invasive breast carcinoma of no special type considering the intratumoral morphological heterogeneity. Methods. The technology of laser capture microdissection PALM was used to isolate five types of morphological tumor structures from three patients with invasive carcinoma of no special type (IC NST), luminal A subtype, T1-2NxMx. The level of expression of the cytokine (TNF), growth factor genes (TGFB1, CSF1, CSF2, VEGFA) and the HIF1A gene was assessed in the samples obtained using real-time PCR, TaqMan-probes and specific oligonucleotides. Results. The study demonstrated the absence of the expression of the growth factor gene CSF2 in tumor cells of IC NST, and the expression of the gene CSF1, independent from the metastasis status and tumor structure type. The prevalence of the expression of the genes VEGFA and TGFB1 was revealed in the alveolar and solid structures along with the rare expression of the gene TNF. Conclusions. The expression of pre-metastatic niche genes in the tumors of patients with IC NST is heterogeneous. The hypoxia-mediated change in the cytokine gene expression may be expected in the alveolar and solid structures, which ultimately results in the formation of microenvironment, facilitating tumor growth and the formation of tumor metastatic potential.; Мета. Вивчення експресії генів TGFB1, TNF, CSF1, CSF2, VEGFA і HIF1A у хворих з інвазивною карциномою молочної залози неспецифічного типу з урахуванням внутрішньопухлинної морфологічної гетерогенності. Методи. Із застосуванням технології лазерної мікродисекції PALM проводилося виділення п’яти типів морфологічних структур пухлини від трьох хворих інвазивною карциномою молочної залози неспецифічного типу (IC NST), люмінальний А підтип, T1-2NxMx. В отриманих зразках методом ПЛР в режимі «реального часу» з використанням TaqMan-зондів і специфічних олігонуклеотидів було проведено оцінку рівня експресії генів цитокінів (TGFB1 і TNF), генів факторів росту (CSF1, CSF2, VEGFA) і гена HIF1A. Результати. Проведене дослідження показало відсутність експресії гена ростового фактора CSF2 в пухлинних клітинах IC NST, а також незалежну від статусу метастазування і типу структури експресію гена CSF1. Було виявлено переважання експресії генів VEGFA і TGFB1 в альвеолярних і солідних структурах, а також рідкісна експресія гена TNF. Висновки. Експресія генів преметастатичних ніш в пухлинах хворих з IC NST гетерогенна. В альвеолярних і солідних структурах можна очікувати опосередковану гіпоксією зміну експресії генів хемоаттрактантів, що, в кінцевому рахунку, веде до формування мікрооточення, що сприяє зростанню пухлини і формуванню метастатичного потенціалу пухлини.; Цель. Изучение экспрессии генов TGFB1, TNF, CSF1, CSF2, VEGFA и HIF1A у больных инвазивной карциномой молочной железы неспецифического типа с учетом внутриопухолевой морфологической гетерогенности. Методы. С применением технологии лазерной микродиссекции PALM проводилось выделение пяти типов морфологических структур опухоли от 3 больных инвазивной карциномой молочной железы неспецифического типа (IC NST), люминальный А подтип, T1-2NxMx. В полученных образцах методом ПЦР в режиме «реального времени» с использованием TaqMan-зондов и специфических олигонуклеотидов была проведена оценка уровня экспрессии генов цитокинов (TNF), генов факторов роста (TGFB1, CSF1, CSF2, VEGFA) и гена HIF1A. Результаты. Проведенное исследование показало отсутствие экспрессии гена ростового фактора CSF2 в опухолевых клетках IC NST, а также независимую от статуса метастазирования и типа структуры экспрессию гена CSF1. Было выявлено преобладание экспрессии генов VEGFA и TGFB1 в альвеолярных и солидных структурах, а также редкая экспрессия гена TNF. Выводы. Экспрессия генов преметастатических ниш в опухоли у больных IC NST гетерогенна. В альвеолярных и солидных структурах можно ожидать опосредованное гипоксией изменение экспрессии генов цитокинов, в конечном счете, ведущее к формированию микроокружения, способствующего росту опухоли и формированию метастатического потенциала опухоли.
2015-01-01T00:00:00ZAssociation of Rictor with chromosomes during mitosis in MCF7 cells
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/152700
Association of Rictor with chromosomes during mitosis in MCF7 cells
Malanchuk, O.M.
The mTOR kinase forms two multicomponent protein complexes (mTORC1 and mTORC2), where protein Rictor is a unique component of mTORC2. These two complexes differ both structurally and functionally and transmit signals to distinct downstream substrates. In contrast to mTORC1, comparatively little is known about functioning and regulation of mTORC2 and its components. Aim. To analyze of the particularity of Rictor subcellular localization in MCF7 cells. Methods. Immunofluorescence assay using confocal microscopy was applied. Results. Analysis of Rictor localization with anti N-terminal mAb revealed a different pattern of immunostaining in cells that was depended on cell cycle phase. For the first time it was shown that Rictor is at the exposed edge of condensed chromatin pool in MCF7 cells. Furthermore Z-stacking of cells revealed that character of association depends on mitosis phases. Conclusions. Our novel findings add to our understanding of functioning of both Rictor and mTORC2 in cell cycle progression.; Кіназа mTOR формує два мультикомпонентних комплекси (mTORС1 та mTORС2, унікальним компонентом останнього є Rictor), які відрізняються як структурно, так і функціонально, та мають різні мішені. На відміну від mTORC1, відносно мало відомо про функціонування і регуляцію комплексу mTORC2 і його компонентів. Мета. Аналіз особливостей субклітинної локалізації Rictor в клітинах MCF7. Методи. Імунофлуорисцентний аналіз із використанням конфокальної мікроскопії було застосовано. Результати. Аналіз локалізації Rictor за допомогою моноклональних антитіл до N-термінального фрагменту Rictor продемонстрував диференційний патерн імунофарбування клітин в залежності від стадії клітинного циклу. Вперше виявлено значну поверхневу асоціацію Rictor з конденсованим хроматином в клітинах MCF7. Більш того, Z-стекінг клітин дав можливість зрозуміти характер асоціації, яка, як виявилось, залежить від фази мітозу. Висновки. Дані, отримані нами вперше, вносять вклад в розуміння функціонуваня як білкаRictor, так і комплекса mTORС2 в прогресії клітинного циклу.; Киназа mTOR формирует два мультикомпонентных комплекса (mTORC1 и mTORC2, уникальным компонентом последнего является Rictor), которые отличаются как структурно, так и функционально и имеют разные мишени. В отличии от mTORC1, относительно мало известно о функционировании и регуляции комплекса mTORC2 и его компонентов. Цель. Анализ особенностей субклеточной локализации Rictor в клетках MCF7. Методы. Иммунофлюорисцентный анализ с использованием конфокальной микроскопии был применён. Результаты. Анализ локализации Rictor с помощью моноклональных антител к N-терминальному фрагменту Rictor выявил дифференциальный паттерн иммуноокрашивания клеток в зависимости от стадии клеточного цикла. Впервые удалось показать значительную поверхностную ассоциацию Rictor с конденсированным хроматином в клетках MCF7. Более того, Z-стекинг клеток позволил понять характер ассоциации, которая, как оказалось, зависит от фазы митоза. Выводы. Данные, полученные нами впервые, вносят вклад в понимание функционирования как белка Rictor, так и комплекса mTORС2 в прогрессии клеточного цикла.
2015-01-01T00:00:00ZInteractome of invadopodia scaffold protein TKS5
http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/152699
Interactome of invadopodia scaffold protein TKS5
Kropyvko, S.V.
TKS5 is a scaffold protein that takes part in invadopodia functioning and reactive oxygen species (ROS) production. TKS5 is a critical component of invadopodia as its absence results in the loss of cancer cells ability to form these invasive structures. TKS5 is phosphorylated by SRC kinase and consequently interacts with the membrane phosphatidylinositol phosphates launching the invadopodia formation process. At later stages TKS5 regulates the actin cytoskeleton reorganization and extracellular matrix degradation. TKS5 also regulates the production of ROS, which are the important signal regulators of different cellular functions.; TKS5 скафолдний білок, який приймає участь у функціонуванні інвадоподій та продукції активних форм кисню (ROS). TKS5 критично важливий компонент інвадоподій оскільки за його відсутності ракові клітини втрачають можливість утворювати ці структури інвазивності. Він фосфорилюється SRC-кіназою в наслідок чого взаємодіє з фосфотидилінозитид фосфатами мембрани запускаючи процес утворення інвадоподій. На більш пізніх етапах TKS5 регулює реорганізацію актинового цитоскелету та деградацію позаклітинного матриксу. TKS5 також регулює продукцію ROS, які є важливими регуляторами сигналів різноманітних клітинних функцій.; TKS5 скаффолдный белок, который принимает участие в функционировании инвадоподий и продукции активных форм кислорода (ROS). TKS5 критически важный компонент инвадоподий поскольку при его отсутствии раковые клетки утрачивают возможность образовывать эти структуры инвазивности. Он фосфорилируется SRC-киназой в следствии чего взаимодействует с фосфотидилинозитид фосфатами мембраны запуская процесс образования инвадоподий. На более поздних этапах TKS5 регулирует реорганизацию актинового цитоскелета и деградацию внеклеточного матрикса. TKS5 также регулирует продукцию ROS, которые являются важными регуляторами сигналов разнообразных клеточных функцій.
2015-01-01T00:00:00Z