Биополимеры и клетка, 2000, том 16http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/1510472024-03-29T08:10:11Z2024-03-29T08:10:11ZПолучение и характеристика мышиного гена, гомологичного Nnp-1 гену человека, картированному на участке хромосомы 21 q22.3Скрипкина, И.Я.Цыба, Л.А.Славов, Д.Кваша, С.М.Гардинер, К.Рындич, А.В.http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/1542232019-06-15T22:30:04Z2000-01-01T00:00:00ZПолучение и характеристика мышиного гена, гомологичного Nnp-1 гену человека, картированному на участке хромосомы 21 q22.3
Скрипкина, И.Я.; Цыба, Л.А.; Славов, Д.; Кваша, С.М.; Гардинер, К.; Рындич, А.В.
Получена новая мышиная кДНК и ген, гомологичные гену нового ядерного белка человека (Nnp-1), картированному на участке 21-й хромосомы человека q22.3. Определена их полная нуклеотидная последовательность. Геномное секвенирование показало, что мышиный ген Nnp-І состоит из 13 экзонов, расположенных на 14,5 тыс. п. н. Определена структура гена Nnp-І человека, проведен сравнительный анализ генов Nnp-І человека и мыши. Показано, что уровень экспрессии гена Nnp-1 в мозге не изменяется на протяжении жизни животного, и экспрессия его в различных тканях нормальных и трисомных мышей идентична.; Отримано нову мишачу кДНК і ген, гомологічні гену нового ядерного білка людини (NNP-І), картованому на ділянці 21-ї хромосоми людини q22.3. Визначено їхню повну нуклеотидну послідовність. Геномне секвенування показало, що ген Nnp-1 миші має 13 екзонів, розташованих на 14,5 тис. п. н. Визначено структуру гена NNP-І людини, здійснено порівняльній аналіз генів NNP-І людини і миші Показано, що рівень експресії гена Nnp-І в мозку миші не змінюється протягом життя тварини, і експресія його в різних тканинах нормальних та трисомних мишей ідентична.; New mouse cDNA and gene homologous to human Novel Nuclear Protein (NNP-1) gene, mapped on q22.3 region of human chromosome 21, have been obtained and sequenced. Genomic sequencing has revealed that mouse Nnp-1 gene consisted of 13 exons distributed by 14.5 kb. The structure of human NNP-1 gene has been determined and comparative analysis of human and mouse NNP-1 genes has been fulfilled. It has been shown that the level of expression of mouse Nnp-1 gene in brain was not changed during the life cycle of the animal, and the expression of Nnp-1 gene in different tissues of normal and trisomic Ts65Dn mice were identical.
2000-01-01T00:00:00ZТранспорт ионов натрия на ранних этапах дифференцировки клеток нейробластомы человека, индуцированной рекомбинантным интерфероном-альфа 2b (лафероном)Рожманова, О.М.Долгая, Е.В.Стельмах, Л.Н.Погорелая, Н.Х.Кучер, В.В.Миранский, А.В.Магура, И.С.Мацука, О.М.http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/1542222019-07-05T16:28:35Z2000-01-01T00:00:00ZТранспорт ионов натрия на ранних этапах дифференцировки клеток нейробластомы человека, индуцированной рекомбинантным интерфероном-альфа 2b (лафероном)
Рожманова, О.М.; Долгая, Е.В.; Стельмах, Л.Н.; Погорелая, Н.Х.; Кучер, В.В.; Миранский, А.В.; Магура, И.С.; Мацука, О.М.
Исследовали влияние рекомбинантного интерферона (ИФН)-альфа 2b (лаферона) на транспорт ионов ²²Na⁺ в клетках нейробластомы человека линии IMR 32. Показано, что ИФН-альфа 2b (600 ME/мл) к концу первых суток воздействия тормозит пролиферацию и индуцирует морфологическую дифференцировку примерно 50 % культивируемых клеток. Переход клеток в дифференцированное состояние сопровождается изменением потоков ионов натрия через плазматическую мембрану. В первые минуты после воздействия ИФН-альфа 2b входящий поток ионов ²²Na⁺ в недифференцированных клетках уменьшается на 20 % по сравнению с контролем. В этих клетках деполяризация плазматической мембраны смесью вератрина (200 мкг/мл) и токсина скорпиона Leiurus quinquestriatus (10 мкг/мл) вызывает увеличение входящего потока ионов ²²Na⁺ на 50 %. В дифференцированных клетках при деполяризации их нейротоксинами входящий поток ионов ²²Na⁺ в 3.2 раза больше, чем в недифференцированных. Тетродотоксин (ТТХ) в концентрации 4 · 10⁻⁷ М полностью блокирует входящий поток в недифференцированных клетках, а в дифференцированных–уменьшает его на 50 %. Вероятно, это свидетельствует о том, что в дифференцированных ИФН-альфа 2b клетках нейробластомы появляются потенциалуправляемые ТТХ-нечувствительные натриевые каналы. Активность Na⁺, К⁺-АТРазы в первые минуты воздействия ИФН-альфа 2b уменьшается в 2 раза. После 22 ч культивирования клеток в среде, содержащей ИФН-альфа 2b, она восстанавливается до 80 % от контрольного уровня. Полученные in vitro данные можно использовать для оценки антипролиферативного действия лаферона in vivo.; Досліджували вплив рекомбінантного інтеррону (IФН)-альфа 2b (лаферону) на транспорт іонів Na⁺ в клітинах нейробластоми людини лінії IMR 32. Показано, що ІФН-альфа 2b (600 МЕ/мл) наприкінці першої доби дії гальмував проліферацію та викликав морфологічне диференціювання принаймні 50 % культивованих клітин. Перехід клітин у диференційований стан супроводжувався зміною потоків іонів натрію через плазматичну мембрану. перші хвилини після дії ІФН-альфа 2b вхідний потік іонів Na в недиференційованих клітинах зменшувався на 20 % порівняно з контролем. У цих клітинах деполяризація плазматичної мембрани, обумовлена внесенням вератрину (200 мкг/мл) та токсину скорпіна Leiurus quinquestriatus (200 мкг/мл), призводила до збільшення вхідного потоку іонів Na⁺ на 50 %. У диференційованих клітифрх при деполяризації їх нейротоксинами вхідний потік іонів Na⁺ був у 3,2 разу більшим, ніж у недиференційованих. Тетродотоксин (ТТХ) у концентрації 4·10⁻⁷ М повністю блокував вхідний потік у недиференційованих клітинах. У диференційованих клітинах вказаний потік під впливом ТТХ зменшувався на 50 %. Це є свідченням того, що в процесі диференціювання, індукованого ІФН-альфа 2b, у плазматичних мембранах клітин IMR 32 з'являються потенціалзалежні нечутливі до ТТХ натрієві канали. Активність Na⁺ , К⁺ -АТРази в перші хвилини дії IФН-альфи 2b зменшувалася у 2 разу порівняно з контролем. Протягом першої доби від початку дії ІФН-альфа 2b активність ферменту відновлювалася і складала 80 % від контрольного рівня. Отримані in vitro дані дають можливість наблизитися до розуміння механізмів нейроімунної взаємодії та оцінки антипроліферативної дії лаферону in vivo.; We investigated the sodium transport induced by the recombinant interferon (IFN)-alpha 2b (laferon) in the human neuroblastoma cell line JMR 32. It has been found that IFN-alpha 2b (600 lU/ml) inhibited cell proliferation and induced morphological differentiation in 50 % of these cells by the end of the first day of incubation. This process was accompanied by an alteration in the ionic transport across the cell membrane. We have demonstrated that in undifferentiated cells, IFN-alpha 2b decreased Na influx by 20 % compared to the control cells. The membrane depolarization in these cells, induced by veratrine (200 ng/ml) in the quesence of Leiurus quinauestriatus venom (10 fig/ml), increased Na influx by 50 %. In the depolarized differentiated cells, Na influx was 3.2 times larger than in the depolarized undifferentiated cells. Tetrodotoxin (4·10⁻⁷ M) completely blocked Na influx in the depolarized undifferentiated cells and reduced this influx by 50 % in the depolarized differentiated cells. These data indicate that voltage-operated tetrodotoxin-insensitive sodium channels are expressed in the neuroblastoma cells after the differentiation by IFN-alpha 2b. The Na⁺ , K⁺ -ATPase activity has decreased by half within 5 minutes of the IFN-alpha 2b addition. The enzyme activity increased up to 80 % of the control level after 22 h of exposure to IFN-alpha 2b. The in vitro data encouraged pilot studies to evaluate the in vivo antiproliferative effect of laferon.
2000-01-01T00:00:00ZВзаємодія ціанінових барвників з нуклеїновими кислотами. 12. Нові монометинові ціаніни на основі 5,6-метилендіоксибензотіазолу та спектрально-люмінесцентні властивості їхніх комплексів з нуклеїновими кислотамиЛукашов, С.С.Лосицький, М.Ю.Ярмолюк, С.М.Сломінський, Ю.Л.http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/1542212019-07-05T16:42:52Z2000-01-01T00:00:00ZВзаємодія ціанінових барвників з нуклеїновими кислотами. 12. Нові монометинові ціаніни на основі 5,6-метилендіоксибензотіазолу та спектрально-люмінесцентні властивості їхніх комплексів з нуклеїновими кислотами
Лукашов, С.С.; Лосицький, М.Ю.; Ярмолюк, С.М.; Сломінський, Ю.Л.
На основі ядра 5,6-метилендіоксибензотіазолу синтезовано сім нових монометинових ціанінових барвників з гетероциклічними залишками різної геометрії та електронодонорності. Досліджено їхні оптичні властивості в присутності ДНК, РНК та білка. Деякі з синтезованих барвників є перспективними об'єктами для подальших досліджень та застосування в аналізі нуклеїнових кислот Порівняння флюоресиентних властивостей синтезованих барвників та їхніх аналогів з незаміщеним гетерозалишком бензотіазолу в присутності нуклеїнових кислот дозволило зробити деякі уточнення до моделі напівінтеркаляції монометинових ціанінів у ДНК; На основе ядра 5,6-метилендиоксибензотиазола синтезирован ряд новых монометинових цианиновых красителей с гетероциклическими остатками разной геометрии и электронодонорности. Исследованы их оптические свойства в присутcтвии двухцепочечной ДНК, РНК и белка. Некоторые из синтезированных красителей оказались перспективными объектами для дальнейших исследований и применения в анализе нуклеиновых кислот (НК). Сравнение флюоресцентных свойств синтезированных красителей и их аналогов с незамещенным гетероостатком бензотиазола в присутствии НК позволило сделать некоторые уточнения модели полуинтеркаляции монометинових цианинов в ДНК; Seven novel monomethyne cyanine dyes with the 5,6-methylene-dioxy-benzothiazole ring fused with the heterocycles of different geometry and basisity were synthesised. Their optical properties in presence of dsDNA, UNA and protein were studied. Some of synthesised dyes are perspective objects for further investigations and applying in the NA analysis. The comparison of fluorescent properties of studied dyes and their analogues with unsubstituted benzothiazole ring in presence of nucleic acids allowed us to confirm the hypothesis of «half-intercalation» of monomethyne cyanines into dsDNA.
2000-01-01T00:00:00ZВиділення сайт-специфічної ендонуклеази Streptomyces sp. 48Лук'янчук, В.В.Суханов, С.М.Поліщук, Л.В.Мацелюх, Б.П.http://dspace.nbuv.gov.ua:80/xmlui/handle/123456789/1542202019-07-05T16:49:54Z2000-01-01T00:00:00ZВиділення сайт-специфічної ендонуклеази Streptomyces sp. 48
Лук'янчук, В.В.; Суханов, С.М.; Поліщук, Л.В.; Мацелюх, Б.П.
Розроблено метод виділення і очищення сайт-специфічної ендонуклеази рестрикції II типу Streptomyces sp. 48. Було встановлено, що в лізаті міцелію штаму Streptomyces sp. 48 міститься тільки один фермент, який має сайт-специфічну ендонуклеазну активність. Максимальну елюцію ферменту зареєстровано при значенні іонної сили 350 мМ NaCL Представлений метод забезпечує достатнє очищення і концентрування ферменту із збереженням специфічної активності.; Разработан метод выделения и очистки сайт-специфической эндонуклеазы рестрикции II типа Streptomyces sp48. Установлено, что лизат мицелия штамма Streptomyces sp. 48 содержит только один фермент, имеющий сайт-специфическую эндонуклеазную активность. Максимальная элюция эндонуклеазы зарегистрирована при ионной силе буфера 350 мМ NaCl. Представленный метод обеспечивает достаточную очистку и концентрирование фермента с сохранением специфической активности.; A method of isolation and purification of site-specific endonuclease of the II type Streptomyces sp. 48 has been worked out. ft has been determined that the Streptomyces sp. 48 lysate contains only one enzyme with site-specific activity. Maximum elution of the endonuclease was made by buffer with ionic strength of 350 mM NaCl. This method provides sufficient purification and concentration of this enzyme with preservation of its specific activity.
2000-01-01T00:00:00Z